Качественное определение липидов сыворотки крови
В крови содержатся триглицериды, фосфолипиды, эфиры холестерина, свободный холестерин и неэстерифицированные жирные кислоты.
Жиры, всасывающиеся слизистой оболочкой тонкого кишечника, в лимфе и в крови находятся в виде хиломикронов – мельчайших капелек, содержащих до 1 % белка. Большинство липидов содержится в комплексе с белками.
Повышенное содержание триглицеридов в сыворотке крови может свидетельствовать о снижении их превращений в тканях.
ПРИНЦИП РАБОТЫ:
Липиды можно открыть по реакции с красителями суданового ряда (например, с Суданом черным образуется розовое окрашивание).
РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:
1) судан, 1 % спиртовой раствор; 2) этанол (разбавляют водой в 2 раза непосредственно перед работой); 3) сыворотка крови; 4) растительное масло; 5) дистиллированная вода; 6) бумага для хроматографии (нарезается полосками шириной 4-5 см); 7) чашки Петри.
ХОД РАБОТЫ:
Каплю сыворотки наносят на полоску хроматографической бумаги, высушивают при температуре не выше 90 ºС. Для сравнения на 2-ую полоску бумаги наносят каплю растительного масла, на 3-ю – каплю дистиллированной воды. Полоски высушивают.
Помещают полоски бумаги в чашки Петри, заливают суданом и оставляют на 30 минут. После этого бумагу достают, дают стечь Судану. Раствором этилового спирта в чистой чашке Петри промывают бумагу. На месте нанесения сыворотки крови заметно розовое пятно окрашенных липопротеидов и хиломикронов.
Сравните с пятнами от растительного масла и воды.
РЕЗУЛЬТАТЫ и ВЫВОД:
Дата добавления: 2016-01-04; просмотров: 13; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!