Методика определения горечи с помощью спектрофотометра
А)Этот метод описывает процедуру спектроскопии для ручного измерения единиц горечи. Горечь в пиве возникает из группы соединений, которые извлекаются из хмеля и изомеризуются во время кипячения сусла. Термин «единица» горечи (BU) используется для описания концентрации этих соединений.
Б)Метод зависит от подавления ионизации этих соединений путем добавления сильной соляной кислоты для повышения их общего извлечения в изооктан во время встряхивания. Водную и растворимую фракции разделяют центрифугированием. Концентрация соединений горечи в изооктане определяется спектрофотометическим путем измерения поглощения ультрафиолетового (УФ) излучения на длине волны 275 нм в отношении чистого изооктана.
В)Метод может быть применим к суслу, образцам в процессе и упакованному пиву, содержащими восстановленные вещества горечи (ро-изогумулон, тетрагидроизогумулон и гексагидроизогумулон). Метод также подходит для пива с добавлением изомеризованного экстракта хмеля, снижается изомеризация экстракта хмеля, но не делает различий между различными типами материалов.
Г) Меры безопасности:
· Работать в перчатках, защитных очках, маске и т.д. при работе с химическими веществами
· Работать под вытяжным шкафом
· Утилизировать химикаты в соответствии с местными экологическими нормами
· Изооктан, этанол, октанол являются легковоспламеняющимися веществами и должны храниться в прохладном, хорошо вентилируемом шкафу с воспламеняющимися веществами
|
|
|
· Изооктан вреден при вдыхании или поглощении через кожу. Поэтому, автоматическое оборудование необходимо использовать для дозирования.
· Соляная кислота въедлива с вредными парами и поэтому должна быть разбавлена в вытяжном шкафу, добавляя кислоту к воде.
Д) Оборудование:
· УФ-спектрофотометр (275 нм)
· Шейкер с креплениями для того, чтобы держать пробки BU в горизонтальном положении
· Пробирки центрифужные с течебезопасными верхними частями винта
· Градуированная пипетка на 10 мл
· Пипетка (прямая) на 5 мл
· Кювета спектрофотометра (кварц или кремнезем), длина пути 10 мм.
· Мерная колба на 1000 мл
· Автоматический диспенсер или ручной, 20 мл (точный) для дозировки изооктана с точностью 0,0001.
Е) Реактивы:
· Изооктан
· Антивспениватель, разбавленная силиконовая эмульсия 1:10 в воде или октанол
· Соляная кислота, HCl 3М
· Дистиллированная/деионизированная вода
· Ингибитор роста дрожжей, актидион или сопоставимый
· Этанол
· Активированный уголь (гранулы) для очищения изооктана
· Сульфат натрия (гидратированный, сухой) для очищения изооктана.
Утилизация реактивов: изооктан является опасными отходами и должен быть собран в подходящую тару для утилизации. Избегайте использования пластиковых и металлических контейнеров для отходов. В качестве альтернативы изооктан может быть очищен и повторно использован. Все другие жидкости можно утилизировать в раковину и обильно пролить водой.
|
|
|
Ж) Измерение горечи:
1. Проведите дегазацию всех газированных образцов. Для этого может быть использован ультразвук или перемешивание с октанолом (1 мл) или антивспенивателем в течение 5 минут. Для обработки ультразвуком колбу с анализируемым веществом помещают в ультразвуковую ванну и оставляют на 3 минуты;
2. Позвольте ультрафиолетовой лампе нагреться для стабильности;
3. Поменяйте кюветы между измеряемой и сравнительной ячейкой для верификации того, что они сопоставимы и чистые. Абсорбция должна быть стабильной около 0.005;
4. Калибруйте спектрофотометр на длине волны 275 нм относительно изооктана;
5. Аккуратно отберите пипеткой 10 мл подготовленного образца в пробирку для горечи;
6. Аккуратно добавьте 1 мл соляной кислоты 3М в колбу и перемешайте;
7. Количественно добавьте 20 мл изооктана в колбу;
8. Немедленно закройте колбу для горечи и убедитесь, что пробка герметична;
|
|
|
9. Поместите колбу на шейкер для горечи;
10. Установите шейкер на предварительно оптимизированную скорость и время 10 минут;
11. После 10 минут дайте постоять колбе в состоянии покоя еще 20 минут;
12. Промойте и заполните 10 мм ячейку верхним слоем изооктана;
13. Измерьте абсорбцию образца при длине волны 275 нм в отношении кюветы к изооктану;
14. Измерение BU при обычном охмелении (˂50% модифицированных хмелей)
Единицы горечи BU (50) = 50 * A275 * D
A275-оптическая плотность при 275нм, измеренная относительно чистого изооктана
D-фактор разбавления, если образец разбавлен 1:1, т.е. 5 мл образца + 5 мл воды, D=2;
15. Соблюдайте местные требования к отчетности. Как правило, BU определяется до одного десятичного знака, который является статистической возможностью метода.
Дата добавления: 2018-08-06; просмотров: 2075; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!