Дополнительное подтверждение принадлежности выявленных бактерий к колиформным бактериям
10.1 При необходимости, для дополнительного подтверждения принадлежности бактерий, выросших на жидких средах (там, где отмечено газообразование), к колиформным бактериям делают пересевы по ГОСТ 26670 на поверхность одной из агаризованных селективно-диагностических сред (6.5-6.7). Посевы инкубируют при температуре (37±1) °С в течение (24±3) ч. После термостатирования отмечают рост типичных и атипичных колоний.
10.2 Для дополнительного подтверждения принадлежности выросших бактерий к колиформным бактериям отбирают не менее чем по пять типичных и атипичных колоний из чашек Петри с посевами по 9.3.3.
Атипичные колонии отбирают те, в которых подтверждено наличие колиформных бактерий посевом в жидкую подтверждающую среду.
10.3 Каждую отобранную для подтверждения колонию пересевают на поверхность скошенного питательного агара по 6.9 или 6.10, посевы термостатируют при температуре (31±1) °С с течение (24±3) ч.
Принадлежность к колиформным бактериям определяют по отношению к окраске по Граму, по отсутствию оксидазы, по ферментации лактозы на среде Гисса.
10.3.1 Окраска по Граму
Приготовление мазков из культур, выросших на скошенной поверхности питательного агара, и окраску их по Граму, проводят по ГОСТ 30425. Колиформные бактерии являются грамотрицательными палочками.
Допускается окраску по Граму заменять тестом Грегорсена, для этого на предметном стекле в капле 3%-ного водного раствора калия гидроокиси эмульгируют петлей культуру микроорганизмов, взятую из колонии с плотной среды. Если через несколько секунд за петлей тянутся слизистые нити, то это указывает на принадлежность испытуемой культуры к грамотрицательному виду. У грамположительных бактерий слизистых нитей не образуется.
|
|
10.3.2 Определение отсутствия оксидазы
Определение отсутствия оксидазы проводят по ГОСТ 29184.
Для определения оксидазы допускается использование дисков и растворов отечественного и импортного (зарегистрированных в Российской Федерации) промышленного производства. Для контроля качества дисков и растворов используют музейные оксидазоположительные и оксидазоотрицательные культуры.
10.3.3 Определение ферментации лактозы
Для определения ферментации лактозы испытуемую культуру высевают уколом в среду Гисса с лактозой.
Посевы термостатируют при температуре (37±1) °С в течение (24±3) ч.
Колиформные бактерии ферментируют лактозу с образованием кислоты (цвет среды меняется) и газа.
10.4 По результатам дополнительного подтверждения к колиформным бактериям относят аэробные и факультативно-анаэробные не образующие спор грамотрицательные оксидазоотрицательные палочки, сбраживающие лактозу с образованием кислоты и газа.
|
|
11 Протокол испытания*
_______________
* Наименование пункта 11 в бумажном оригинале выделено курсивом. - Примечание изготовителя базы данных.
Результаты оценивают по каждой пробе отдельно.
Протокол испытания должен включать:
- всю информацию, необходимую для полной идентификации продукта;
- используемый метод в соответствии с настоящим стандартом;
- все детали испытания, не установленные настоящим стандартом;
- полученный(е) результат(ы).
Приложение А
(справочное)
Схема выявления колиформных бактерий
А.1 Схема выявления колиформных бактерий приведена на рисунке А.1.
Рисунок А.1
Приложение Б
(справочное)
Сопоставление структуры настоящего стандарта со структурой примененных в нем международных стандартов
Б.1 Сопоставление структуры настоящего стандарта со структурой ИСО 4831:2006 приведено в таблице Б.1
Таблица Б.1
Структура международного стандарта | Структура настоящего стандарта | ||||
Раздел | Пункты | Подпункты | Раздел | Пункты | Подпункты |
1 Область распространения | - | - | 1 Область применения | - | - |
2 Нормативные ссылки | - | - | 2 Нормативные ссылки | - | - |
3 Термины и определения | 3.1-3.3 | - | 3 Термины и определения | 3.1-3.3 | 3.3.1, 3.3.2 |
4 Сущность метода | 4.1, 4.2 | 4.1.1-4.1.3, 4.2.1-4.2.6 | 4 Метод выявления колиформных бактерий и определение количества по методу НВЧ | 4.1, 4.2 | 4.1.1-4.1.3, 4.2.1-4.2.5 |
5 Питательные среды и разведения | 5.1-5.4 | - | 6 Питательные среды и реактивы | 6.1-6.14 | - |
6 Аппаратура и посуда | 6.1-6.7 | - | 7 Аппаратура, посуда, материалы и реактивы | - | - |
7 Отбор проб | - | - | 8 Отбор и подготовка проб | - | - |
8 Приготовление проб | - | - | |||
9 Испытание | 9.1, 9.2 | 9.1.1-9.1.4, 9.2.1-9.2.4 | 9 Проведение испытания | 9.1, 9.2 | 9.1.1-9.1.4, 9.2.1-9.2.5 |
10 Подсчет и выражение результатов | - | - | 10 Дополнительное подтверждение принадлежности выявленных бактерий к колиформным бактериям | 10.1-10.4 | - |
11 Точность | - | - | - | - | - |
12 Протокол испытания | - | - | 11 Протокол испытания | - | - |
Приложение А | - | - | Приложение А | - | - |
|
|
Б.2 Сопоставление структуры настоящего стандарта со структурой ИСО 4832:2006 приведено в таблице Б.2
Таблица Б.2
|
|
Структура международного стандарта | Структура настоящего стандарта | ||||
Раздел | Пункты | Подпункты | Раздел | Пункты | Подпункты |
1 Область распространения | - | - | 1 Область применения | - | - |
2 Нормативные ссылки | - | - | 2 Нормативные ссылки | - | - |
3 Термины и определения | 3.1 | - | 3 Термины и определения | 3.1-3.3 | - |
4 Сущность метода посева в агаризованную среду | 4.1-4.4 | - | 5 Методы определения количества колиформных бактерий - подсчет колоний | 5.1, 5.2 | 5.1.1-5.1.3, 5.2.1-5.2.3 |
5 Питательные среды и разведения | 5.1-5.4 | - | 6 Питательные среды и реактивы | 6.1-6.14 | - |
6 Аппаратура и посуда | 6.1-6.11 | - | 7 Аппаратура, посуда, материалы и реактивы | - | - |
7 Отбор проб | - | - | 8 Отбор и подготовка проб | - | - |
8 Подготовка проб | - | - | |||
9 Испытание с подтверждением принадлежности только атипичных колоний к колиформным бактериям | 9.1-9.4 | 9.2.1-9.2.4 | 9 Проведение испытания | 9.3 | 9.3.1-9.3.6 |
10 Выражение результатов | - | - | 10 Дополнительное подтверждение принадлежности выявленных бактерий к колиформным бактериям | 10.1-10.4 | - |
11 Точность | - | - | - | - | - |
12 Протокол испытания | - | - | 11 Протокол испытания | - | - |
- | - | - | Приложение А | - | - |
Приложение В
(справочное)
Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов национальным стандартам Российской Федерации, использованным в настоящем стандарте в качестве нормативных ссылок
Таблица В.1
Обозначение ссылочного межгосударственного и национального стандарта Российской Федерации | Обозначение и наименование ссылочного международного стандарта и условное обозначение степени его соответствия ссылочному национальному стандарту |
ГОСТ Р 51446-99* (ИСО 7218-96) | ИСО 7218:1996 "Микробиология продуктов питания и кормовых продуктов. Общие правила микробиологических исследований" (MOD) |
ГОСТ 9284-75 | - |
ГОСТ 10444.1-84 | - |
ГОСТ 24104-2001 | - |
ГОСТ 25336-82 | - |
ГОСТ 26668-85 | - |
ГОСТ 26669-85 | - |
ГОСТ 26670-91 | - |
ГОСТ 29184-91 | - |
ГОСТ 30425-97 | - |
* С 1 января 2010 г. введен в действие ГОСТ Р ИСО 7218-2008. |
Электронный текст документа
подготовлен ЗАО "Кодекс" и сверен по:
официальное издание
Продукты пищевые, консервы.
Методы микробиологического анализа:
Сб. ГОСТов. - М.: Стандартинформ, 2010
Вы можете также:
- Запросить поиск нужного вам документа
ЗАО «Кодекс»
Дата добавления: 2020-12-12; просмотров: 85; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!