Агар лактозный с бриллиантовым зеленым и феноловым красным



6.6.1 Состав:

         
  мясной экстракт 3 г;    
  пептон 10 г;

 

  лактоза (С Н О ·Н О) 10 г;

 

  хлористый натрий 5 г;

 

  двузамещенный фосфорнокислый калий (K НРО ) 0,5 г;

 

  раствор фенолового красного по 6.6.3 40 см ;

 

  раствор бриллиантового зеленого по 6.2.3 2 см ;

 

  агар 12-18 г

 

    (зависит от желирующей способности агара);

 

  вода 1000 см .

 

6.6.2 Приготовление

При нагревании растворяют в воде компоненты. При отсутствии мясного экстракта допускается использовать вместо мясного экстракта, пептона и дистиллированной воды мясопептонный бульон, приготовленный по ГОСТ 10444.1. Смесь нагревают до полного растворения компонентов, доводят объем до 1 дм , охлаждают до 45 °С - 55 °С, устанавливают рН так, чтобы после стерилизации он составлял при температуре 25 °С (7,0±0,1), разливают мерно в колбы или флаконы. Среду стерилизуют при температуре (115±1) °С в течение 20 мин, затем охлаждают до 45 °С - 55 °С. После стерилизации прибавляют раствор фенолового красного и раствор бриллиантового зеленого.

6.6.3 Раствор фенолового красного

6.6.3.1 Состав:

         
  феноловый красный 0,2 г;    
  вода 100 см .

 

6.6.3.2 Приготовление

Феноловый красный переносят в фарфоровую ступку и постепенно растворяют в дистиллированной воде. Раствор переливают в мерную колбу вместимостью 100 см и доводят водой до метки.

Агар Эндо


Среду готовят по инструкции на этикетке.

Среда Гисса с лактозой


Среду готовят по инструкции на этикетке или по ГОСТ 10444.1.

6.9 ГРМ-агар (сухой питательный агар на основе гидролизата рыбной муки для культивирования бактерий)

Среду готовят по инструкции на этикетке.

Мясопептонный агар


Среду готовят по ГОСТ 10444.1.

6.11 При использовании для приготовления питательных сред натуральной говяжьей желчи ей заменяют сухую (1 г сухой желчи равен 10 см натуральной желчи). При этом количество дистиллированной воды, используемой для приготовления сред, уменьшают на количество натуральной желчи (т.е. общий объем среды должен быть равен 1 дм ).

6.12 Растворы, приготовленные по 6.2.3, 6.3.3, 6.4.3, 6.5.3 и 6.6.3, хранят в закрытых сосудах из темного стекла при комнатной температуре не более 3 мес.

6.13 Растворы и реактивы для окраски по Граму готовят по ГОСТ 10444.1.

6.14 Допускается использование готовых и дегидратированных питательных сред, в т.ч. хромогенных, отечественного и импортного производства, зарегистрированных в Российской Федерации.

Аппаратура, посуда, материалы и реактивы


Приемлемой альтернативой посуде многоразового применения является одноразовая посуда, если она отвечает соответствующим требованиям.

Используют обычное лабораторное оборудование и реактивы для микробиологических исследований по ГОСТ Р ИСО 7218, ГОСТ 10444.1 со следующими дополнениями:

- весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания 200 г (для взвешивания реактивов) с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более ±0,01 мг по ГОСТ 24104;

- весы лабораторные с наибольшим пределом взвешивания 1 кг (для взвешивания продукта) с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более ±20 мг по ГОСТ 24104;

- микроскоп биологический, обеспечивающий просмотр в проходящем свете, с увеличением 900 - 1000 ;

- прибор для мембранной фильтрации;

- бактериологическая петля платино-иридиевая или никель-хромовая приблизительно 3 мм в диаметре;

- стекла предметные по ГОСТ 9284;

- пробирки размером приблизительно 16х160 мм и 20х200 мм по ГОСТ 25336;

- пробирки Дархам (поплавки) размером, подходящим для использования в пробирках размером 16х160 мм;

- термостат с диапазоном рабочих температур 28 °С - 55 °С, позволяющий поддерживать заданную температуру с допустимой погрешностью ±1°С;

- бриллиантовый зеленый;

- желчь говяжья сухая или натуральная;

- мясной экстракт;

- нейтральный красный;

- триптический гидролизат желатины;

- триптоза;

- феноловый красный;

- ферментативный перевар животных тканей;

- ферментативный перевар казеина;

- ферментативный перевар молока и животных протеинов;

- дрожжевой экстракт.

Отбор и подготовка проб


Отбор и подготовка проб по ГОСТ 26668, ГОСТ 26669.

Важно, чтобы для испытания поступила представительная проба, не поврежденная и не измененная в ходе транспортирования или хранения.

Проведение испытания


Схема проведения испытания приведена в приложении А.


Дата добавления: 2020-12-12; просмотров: 154; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:






Мы поможем в написании ваших работ!