Определение жизнеспособности метацеркариев
Для определения жизнеспособности метацеркариев описторхид имеется ряд методов.
Морфологический метод. Выделеные из ткани рыбы метецеркарии переносят в каплю физраствора на предметное стекло, осторожно накрывают покровным стекломи исследуют сначала под малым, а затем под большим увеличением микроскопа. Признаком гибели личинок являются только грубые изменения структуры, явное нарушение целостности оболочек цисты, зернистый распад её содержимого; разрушение экскреторного пузыря. Менее выраженные признаки деструкции (изменение формы цисты, изменение цвета и т.д.) не могут служить основанием для признания метацеркариев мёртвыми.
Метод определения подвижности личинки. Метацеркарии описторхид обладают способностью двигаться внутри цисты. Движения усиливаются при механическом (надавливание) или термическом (подогревание) раздражении личинки. Наличие даже самых слабых самостоятельных движений свидетельствует о жизнеспособности метацеркария, в то же время их отсутствие ещё не говорит о гибели личинки.
Для провокации двигательной активности метацеркариев используют химические раздражители. На выделенных из окружающих тканей метацеркариев наслаивают несколько капель (так, чтобы полностью покрыть личинок) химического реагента. Для ускорения эксцистирования личинки можно подогреть над пламенем спиртовки или же подогреть до 360С жидкость перед наслаиванием:
|
|
|
а) воздействие желчью. Метод воздействия дуоденальным содержимым или желчью, полученной при зондировании человека, приводит к эксцистированию 87% всех личинок;
б) воздействие трипсином. При воздействии 0,5 %-ным раствором трипсина, приготовленным на физрастворе, уже через 10 – 15 с начинается выход личинок и их активное движение, которое сохраняется при температуре 36 – 370С от нескольких минут до нескольких часов. При этом эксцистируется 97 % всех личинок.
Объективным критерием жизнеспособности личинок при применении химических раздражителей являются те или другие проявления двигательной активности личинок. Отсутствие в течение 10 – 15 мин всякой двигательной реакции и пожелтение метацеркариев свидетельствуют о нежизнеспособности личинок.
Перечень необходимого оборудования
Лабораторные столы, табуреты, микроскоп световой, микроскоп стереоскопический (бинокуляр), термостат, лабораторные весы, скальпели, пинцеты, ножницы, иглы препаровальные, компрессории или стёкла для компрессии (8 – 9 х 10 – 12 см), стёкла предметные, стёкла покровные, мерная посуда (мензурки, цилиндры, стаканы), пипетки химические, пипетки глазные, вата, марля, кюветы эмалированные, банки или вёдра для отходов, дезинфицирующие средства, сетка металлическая, воронки, чашки Петри, часовые стёкла, спиртовка, искусственный желудочный сок, 0,5 %-ный раствор трипсина, физиологический раствор.
|
|
|
Учёт результатов
При учёте результатов исследования рыбы на заражённость метацеркариями описторхид в лабораторном журнале должны быть отражены следующие данные и показатели: место откуда доставлена рыба для исследования, дата поступления, организация, доставившая рыбу, вид рыбы, возраст, длина, общая масса, масса мышечной ткани и средней пробы, число обнаруженных метацеркариев описторхид, их жизнеспособность.
Дата добавления: 2018-06-01; просмотров: 207; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!