Осаждение белков при кипячении
ПРИНЦИП РАБОТЫ:
Воздействие высокой температуры ведет к тепловой денатурации белков, в результате которой происходят необратимые изменения физико-химических и биологических свойств макромолекул.
На скорость и интенсивность процесса будут влиять рН и добавление электролитов. Быстро и наиболее полно белки денатурируют в изоэлектрической точке. Сдвиги рН в кислую и щелочную стороны затормаживают процесс осаждения белков. В сильно кислых и сильно щелочных растворах осаждения белков при кипячении практически не происходит. При добавлении кислот молекулы белка заряжаются положительно, в щелочных растворах они приобретают отрицательные заряды. Прибавление электролитов (например, хлористого натрия) ускоряет процесс осаждения даже в кислой среде.
РЕАКТИВЫ и ОБОРУДОВАНИЕ:
1) раствор яичного белка (без добавления хлористого натрия); 2) CH3COOH, 1 %; 10 %; 3) NaOH, 10 %; 4) NaCl, насыщенный раствор; 5) пробирки; спиртовки; держатели.
ХОД РАБОТЫ:
В пять пробирок наливают по 5 капель раствора яичного белка.
1. В первой пробирке нейтральный раствор белка нагревают до кипения. Жидкость мутнеет, поскольку разрушаются водные оболочки вокруг молекулы белка, и происходит укрупнение его частиц.
2. Во вторую пробирку добавляют 1 каплю 1 % раствора CH3COOH и нагревают. Хлопьевидный осадок белка выпадает скорее и полнее, т.к. при подкислении рН раствора приблизится к изоэлектрической точке белка.
|
|
|
3. В третью пробирку добавляют 0,5 мл 10 % раствора CH3COOH и нагревают. Даже при кипячении осадка не образуется, поскольку белковые мицеллы перезаряжаются и несут положительный заряд, что повышает их устойчивость.
4. В четвертую пробирку приливают 5 капель 10 % CH3COOH и 2 капли насыщенного раствора NaCl и нагревают. Выпадает белый хлопьевидный осадок, т.к. частицы белка теряют заряд вследствие взаимодействия белка с разноименно заряженными ионами хлористого натрия, а так же теряют гидратную оболочку.
5. В пятую пробирку добавляют 2 капли 10 % раствора NaOH, создавая щелочную среду. При кипячении жидкости осадка не образуется, поскольку в щелочной среде отрицательный заряд на частицах белка увеличивается.
Результаты занести в таблицу 3. Отметить положительную реакцию осаждения плюсом, а отрицательную - минусом. Указать в каждом случае причины появления или отсутствия осадка белка.
Таблица 3
| Нейтральная среда | Слабокислая среда | Сильнокислая среда | Сильнокислая среда + электролит | Щелочная среда |
ВЫВОД:
Дата добавления: 2016-01-04; просмотров: 18; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!