Особенности лабораторной диагностики.

Эшерихии.

Таксономия.

Семейство Enterobacteriaceae

Триба Escherichiae

Род Escherichiae

Род представлен 7 видами, из которых основное значение имеет вид E.сoli, включающий возбудителей эшерихиозов и гнойно-воспалительных-процессов заболеваний.

Морфология

Прямые палочковидные бактерии размером от 1,1 до1,5 мкм в длину и 0,3-0,4 мкм в поперечнике, подвижные (перетрихии), но встречаются и неподвижные варианты; большинство имеет капсулу или микрокапсулу.

Культуральные свойства.

E.сoli - аэробы или факультативные анароэбы. Хорошо растут на простых питательных средах. В МПБ при культивировании наблюдается диффузное помутнение. На МПА вырастают слабовыпуклые колонии с ровными краями и гладкой поверхностью. Полупрозрачные, опалесцирующие в проходящем свете (S – форма). Возможен рост в R – форме (колонии с изрезанными краями, шероховатой поверхностью). Иногда вырастают слизистые колонии (М – форма). Дают характерный рост на дифференциально-диагностических средах: на среде Эндо вырастают фуксиново-красные колонии с металлическим блеском; на среде Левина – темно-синие колонии с металлическим блеском, на среде Плоскирева – розовые. Оптимальные условия культивирования: температура 37⁰ С, рН 7,2-7,5.

Биохимические свойства.

E. сoli обладают высокой ферментативной активностью. Разлагают сахара до кислоты и газа. Ферментируют глюкозу, лактозу, манит, арабинозу, сахарозу и др. Образуют индол, аммиак, не образуют сероводорода, восстанавливают нитраты в нитриты, не разжижают желатин. Оксидазоотрицательные, каталазоположительные. Дают отрицательную реакцию Фогес-Проскауэра . В последнее время появились штаммы кишечной палочки, не расщепляющие лактозу и не образующие индол. Разложение лактозы до кислоты и газа является отличительным признаком эшерихий от других энтеробактерий.

Антигенная структура.

Антигенная структкра сложная. Имеются О-, Н-, К- (L, В, А), М- антигены, фимбриальные, рибосомные и многие другие антигены. При сероидентификации наибольшее значение имеют О-, Н-, К- антигены.

О-антиген, групповой, по химической природе это - липополисахаридопротеи- новый комплекс, термостабильный, спиртоустойчивый По нему различают 173 серогруппы.

Н – антиген – типовой термолабильный белок флагеллин (по нему выделяют 57 серотипов).

К – капсульный антиген (кислые полисахариды), тоже типовой (по нему имеется 80 серотипов). К- антиген не однороден – в зависимости от устойчивости к температуре выделяют 3 его разновидности :

L–термолабильный антиген, спиртоустойчивый, разрушается при нагревании до 60 градусов;

А – термостабильный, устойчивый к спирту и формалину, выдерживает 2-3-часовое кипячение;

В – промежуточный по термолабильности между А и L-антигенами.

Типы эшерихий обозначают с указанием антигенной формулы, ука- зывающей на групповую принадлежность E. сoli. Например, О26:К60 или серовар -О26:К60: Н₂.

На практике антигенные свойства кишечных палочек определяются с целью их идентификации. Чаще используются исследования по выявлению О- и Н-антигенов.

Факторы патогенности:

Токсины:

а) эндотоксин (полный О-антиген), оказывает на организм человека пирогенное и токсическое действие, подавляет фагоцитоз;

б) экзотоксин (его образуют некоторые штаммы кишечной палочки), оказывает на макроорганизм энтеропатогенное, гемолитическое, некротическое действие, он термолабильный, по свойствам близок к холерогену.

Структурные элементы и химические компоненты клетки:

а) пили, фимбрии, обеспечивающие адгезию;

б) капсула (образуется некоторыми штаммами кишечной палочки).

Факторы патогенности диареегенных E. сoli контролируется не только хромосомными генами, но и генами, привносимыми плазмидами или умеренными фагами. Особенно важную роль играют плазмиды. У E. сoli обнаружены Col-, R-, F-, HIy-, Ent-плазмиды, а также плазмиды, кодирующие синтез факторов адгезии. Все это указывает на то, что патогенные варианты кишечной палочки могут возникать в результате распространения среди них плазмид и умеренных бактериофагов.

Экология.

E. сoli довольно широко распространены во внешней среде. Они являются обитателями кишечника человека и теплокровных животных. Благодаря высокой устойчивости во внешней среде хорошо переносят высушивание, месяцами сохраняются в почве, в воде, испражнениях. Могут размножаться в пищевых продуктах, особенно в молоке.

Кишечная палочка является санитарно-показательным микроорганизмом, ее обнаружение свидетельствует о свежем фекальном загрязнении объектов внешней среды.

Резистентность.

E. сoli обладают хорошей выживаемостью во внешней среде, сохраняются в почве и воде несколько месяцев. При 56⁰С гибнут в течении 1 часа. Нагревание до 60 С выдерживают не более 15-20 мин. При кипячении погибают мгновенно. 3 % раствор хлорамина убивает их за 10 мин..

Роль в патологии

Эшерихии вызывают эндогенные инфекции (гнойно-воспалительные процессы различной локализации вплоть до сепсиса), а также типичные экзогенные инфекции: острые кишечные заболевания (эшерихиозы) и пищевые отравления (табл. 1).

Эшерихиозы.

Эшерихиозы – острые кишечные заболевания, вызываемые патогенными E. сoli и протекающие по типу энтеритов и энтероколитов.

Возбудители – диареегенные серовары кишечной палочки; они разделены на 5 групп. Морфологически представители разных групп не отличимы друг от друга; их дифференцируют по антигенной структуре и по факторам патогенности.

Эпидемиология.

Заболевание распространено повсеместно. Резервуаром и источником инфекцииявляются люди - больные или бактерионосители.

Механизм передачи -фекально-оральный; пути передачи: пищевой, водный, контактно-бытовой. Загрязненной пищей чаще всего являются молочные изделия, готовые мясные блюда, салаты из вареных овощей. В детских коллективах или в больничных условиях возбудители могут распространяться через предметы обихода, игрушки, через руки персонала или матерей. Водный путь передачи эшерихиозов наблюдается реже. Опасно интенсивное загрязнение водоемов в результате сброса необезвреженных сточных вод.

Важное влияние на заболеваемость оказывают санитарно-гигиенические условия жизни (благоустроенность жилья, обеспеченность доброкачественной питьевой водой и пищевыми продуктами).

Патогенез и клинические проявления.

В настоящее время известно ~170 антигенных вариантов E. сoli, более 80 из них вызывают коли-инфекцию.

Диареегенные серовары кишечной палочки разделены на следующие 5 групп (таблица 1):

1. Энтеропатогенные (ЭПКП) включают 15 серогрупп и 29 сероваров.

2. Энтероинвазивные (ЭИКП) - около 9 серогрупп и 13 сероваров.

3. Энтеротоксигенные (ЭТКП) – 17 серогрупп и 16 сероваров.

4. Энтерогеморрагические (ЭГКП) – 4 серогруппы.

5. Энтероадгезивные (ЭАКП) окончательно не дифференцированы. Отличаются способностью быстро прикрепляться к кишечному эпителию

ЭПКП – вызывают эшерихиозы у детей до 1 года. Возбудители поражают эпителий тонкого кишечника, адсорбируются на поверхности энтероцитов за счет белков наружной мембраны и размножаются здесь, повреждая микроворсинки и вызывая их отторжение. Развивающаяся при этом воспалительная реакция обусловлена действием эндотоскина, который освобождается при разрушении кишечных палочек. Течение болезни – тяжелое, она может длиться неделями. Основные клинические проявления: диарея, рвота, срыгывание пищи, признаки обезвоживания и обессоливания организма. Может развиться гипотрофия.

Таблица 1.

Серовары E. сoli, наиболее часто вызывающие поражения у человека.

Поражения	Серогруппы
Поражения	О – Аг	Н - Аг	К - Аг
Кишечные Энтеротоксигенные Энтеропатогенные Энтероинвазивные Энтерогеморрагические	О6, О8, О15, О20, О25, О27, О63, О78, О80, О85, О114, О115, О126, О128ас, О139, О148,О153, О159,О166, О167. О18, О26, О44, О55, О86, О111 аb, О112, О114, О119, О125 ас, О127, О 128 ab, О142, О158. О28 ас, О29, О112 ас, О115, О124, О135, О136, О143, О144, О152, О164, О167. О26, О111, О157.	Н4, Н7, Н9, Н11, Н12, Н19, Н20, Н21, Н28, Н40. Н2, Н6, Н7, Н11, Н12, Н14, Н18. _ Н6, Н7, Н8, Н11.	_ _ _ -
Инфекции мочевыводящих путей	О1, О2, О4, О6, О7, О8, О9, О11, О18, О22, О25, О62, О75.	_	К1, К2, К5, К12, К13
Бактериемии	О1, О2, О4, О6, О7, О8, О9, О11, О18, О22, О25, О75.	_	К1, К2, К5, К12, К15, К23.
Менингиты	О1, О6, О7, О16, О18, О83	_	К1

ЭТКП вызывают холероподобное заболевание. При помощи пилей они прикрепляются к эпителию нижних отделов тонкого кишечника и продуцируют 2 типа токсинов: термолабильный и термостабильный. Последний представляет собой низкомолекулярный белок, он увеличивает содержание циклического гуанин-монофосфата в клетках эпителия, что приводит к нарушению транспорта молекулярного железа и повышенному выходу воды из клеток. Высокомолекулярный темолабильный токсин напоминает по механизму действия экзотоксин холерного вибриона. Заболевание по характеру течения напоминает легкую форму холеры. В литературе его часто называют диареей путешественников или диареей туристов.

ЭИКП вызывают дизентериеподобное заболевание у детей и взрослых. Адсорбируются на клетках эпителия нижних отделов толстой кишки. Проникают внутрь клеток; размножаясь, разрушают их. Распространяясь по межклеточным пространствам, они поражают соседние клетки, образуя язвы. Вырабатывают шигеллоподобный токсин. Клинические симптомы: вначале – водянистая диарея, затем в испражнениях появляется примесь слизи и крови.

ЭГКП – возбудители геморрагической диареи и гемолитического синдрома. Поражают преимущественно детей. Представлены 4 серогруппами, из которых наиболее частым возбудителем является Е.соli 0157:Н7, выделенная впервые в США (1982г.). Возбудители выделяют шигелоподобный цитотоксин, вызывающий разрушение эндотелия сосудов (он блокирует синтез белков на рибосомах ), в результате чего развиваются ишемия и некроз клеток . Могут поражаться сосуды почек. Клинически наблюдается уремический и гемолитический синдромы, которые протекают довольно тяжело и нередко с летальным исходом.

ЭАКП – описаны с 1985 года. Могут колонизировать разные отделы кишечника, но чаще поражают толстую кишку. Свое название возбудители получили из-за способности быстро прикрепляться к поверхности клеток. Цитотоксинов они не образуют, в клетки не проникают. Клинически заболевание характеризуется упорным диарейным синдромом.

Иммунитет.

Естественная восприимчивость к эшерихиозам – достаточно высокая, она варьирует в разных возрастных группах. После перенесения эшерихиозов формируется гуморальный типоспецифический иммунитет. Образующие антитела не обладают протективными свойствами.

При эшерихиозах, вызываемых ЭПКП, основная защитная роль принадлежит передаваемым новорожденным транспланцентарно антителам и антителам, поступающими с материнским молоком. Большое значение имеет секреторный Ig A, который обеспечивает местный иммунитет. С женским молоком передаются и мукополисахариды, способствующие размножению лактобактерий – антагонистов возбудителей эшерихиозов. Поэтому болеют, в основном, дети-искусственники, гипотрофики. Так как антитела к ЭТКП и ЭТКП относятся к Ig A, среди взрослых чаще страдают лица с ИДС.

Профилактика.

Неспецифическая: ранняя диагностика, изоляция больных, регулярное профилактическое обследование работников детских учреждений (в том числе домов малюток), детских кухонь и т.д. Большое значение имеет строгое соблюдение санэпидрежима в этих учреждениях.

Специфическая профилактика не разработана.

Принципы терапии: диета, назначение противодиарейных средств, нитрофурановых препаратов (фуразолидон), в тяжелых случаях - фторхиноловые (ципрофлоксацин, пефлоксацин); в случаях генерализованных форм (сепсис, менингит, пиелонефрит) – цефалоспорины II-III поколения.

Особенности лабораторной диагностики.

Диагностика эшерихиозов, вызываемых диареегенными E. сoli, основана на выделении чистой культуры возбудителя и ее идентификации с помощью наборов поливалентных ОК- сывороток, содержащих антитела к определенным О - антигенам. В России выпускаются наборы диагностических ОК- сывороток: ОКА, ОКВ, ОКС, ОКЕ. Основная поливалентная сыворотка ОКА содержит антитела к О- и К- антигенам более, чем 20 главных серологических групп, остальные ОК- сыворотки содержат антитела к О- и К- антигенам тех же серогрупп, но в меньшем их сочетании. Реакция агглютинации с выделенной культурой ставится на стекле. При этом последовательно используются все наборы ОК- сывороток. Вначале определяют ОК- серогруппу с живой культурой (одновременно изучают и ее биохимические свойства), а в заключение идентифицируют О- серогруппу, используя адсорбированные О- сыворотки и гретую при 100⁰С в течение часа (для разрушения К- антигена) культуру. Можно применять реакцию коагглютинации, ИФМ.

Для идентификации ЕИКГ могут быть использованы кератоконъюнктивальная проба, проба с дизентерийным фагом, ИФА (для обнаружения белков наружной мембраны, кодируемых плазмидой). Для обнаружения специфических антигенов в испражнениях больных может быть использован РИФ. Наиболее быстрым и специфическим методом диагностики заболеваний, вызываемых диареегенными E. сoli, является применение ДНК- зондов. Они позволяют обнаружить непосредственно гены плазмид, отвечающих за патогенность E. сoli или синтез их цитотоксинов.

Дата добавления: 2020-11-27; просмотров: 129; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

12 3 4 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!