Распределительная хроматография.
Основана на использовании различий в растворимости распределяемого вещества в двух контактирующих несмешивающихся жидких фазах. Обе фазы – ПФ и НФ – жидкие фазы. При перемещении жидкой ПФ вдоль жидкой НФ хроматографируемые вещества непрерывно перераспределяются между обеими фазами. К распределительной относится бумажная.
Бумажная хроматография (хроматография на бумаге).
1. Нормальнофазная (ПФ-неполярный органический растворитель, НФ- вода)
2. Обращеннофазная (ПФ-вода, НФ – неполярный органический растворитель)
Это жидкость - жидкостная распределительная хроматография.
Требования к хроматографической бумаге:
1. готовится из высококачественных, высоковолокнистых сортов хлопка.
2. однородна по плотности и толщине
3. химически чистая
4. инертна по отношению к ПФ и НФ
Недостатки БХ:
1. процесс разделения зависит от состава и свойств бумаги
2. низкая воспроизводимость результатов
3. очень низкая скорость хроматографирования
Техника выполнения: на полоску хроматографической бумаги на линию старта наносят каплю анализируемого раствора, содержащего смесь разделяемых веществ. После испарения растворителя бумагу ниже линии старта помещают в ПФ, располагая вертикально. Закрывают камеру крышкой и проводят хроматографирование до тех пор, пока ПФ не достигнет обозначенной на бумаге линии фронта растворителя. После бумагу сушат и проводят детектирование пятен и идентификацию компонентов смеси.
|
|
Осадочная хроматография.
Сущность метода. Осадочная хроматография основана на использовании химических реакций осаждения разделяемых компонентов смеси с реагентом-осадителем, входящим в состав НФ. Разделение осуществляется вследствие неодинаковой растворимости образующихся соединений, которые переносится подвижной фазы с различной скоростью: менее растворимые вещества переносится с ПФ медленнее, чем более растворимые.
Понятие о ситовой (эксклюзионной) хроматографии. Гель-хроматография.
Метод ситовой хроматографии представляет собой один из вариантов жидкостной распределительный хроматографии. Он основан на использовании в качестве НФ пористых веществ – молекулярных сит, размеры пор которых могут быть больше или меньше размеров частиц разделяемых компонентов. Частицы с размерами, меньшими размеров пор сорбента, проникает вместе с растворителем ПФ в эти поры и могут удерживаться в них, тогда как более крупные частицы не могут проникнуть в поры из-за своих размеров и уносятся с ПФ. Крупные частицы элюируются первыми.
Носитель: гель.
НФ: элюент, находящийся в порах зерен носителя.
|
|
ПФ: этот же элюент, протекающий вдоль слоя частиц полимера.
Гели – представляют собой вещества, способные к набуханию и имеющие поры разного размера.
1. Гидрофильные: декстрановые
2. Гидрофобные: полистерольные (стирогель)
Гели:
1. Мягкие (сефадексы)
· малое число поперечных связей
· способны поглощать большие количества растворителя, увеличиваясь в объеме
· фактор емкости равен 3
· невысокая механическая прочность
· малая скорость движения ПФ
· большинство гелей гидрофильны
2. Полужесткие (сополимеры, стирола и дивинилбензола)
· большое число поперечных связей
· фактор емкости 0,8-1,2
· скорость движения ПФ больше, чем для мягких гелей
· предел ситового исключения 2500-410*106
· в основном гидрофобны
3. Жесткие гели (силикагель)
· диаметр пор меняется в узком интервале
· устойчивы термически и химически
· скорость элюирования высока
· фактор емкости 0,8-1,1
· как гидрофильные, так и гидрофобные
Фактор емкости – это отношение объема растворителя внутри геля к объему растворителя вне гранул геля.
Предел ситового исключения – величина молекулярной массы вещества, выше которой частицы не способны проникать в поры геля.
Растворители:
1. вода
2. толуол
3. хлороформ
4. диметилформамид
Дата добавления: 2020-04-25; просмотров: 441; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!