Клостридиальная анаэробная инфекция
Бактерии рода Clostridium – «газовая гангрена»
Бактериями рода Clostridium –«газовая гангрена» являются:
Ø Clostridium perfringens
Ø Clostridium oedematiens,
Ø Clostridium hystoliticum,
Ø Clostridium septicum.
Все клостридии являются строгими анаэробами и выделяют экзотоксины, приводящие к необратимым изменениям мышечной и соединительной ткани, обладают гемолитическим, тромбогенным, гепато-, нефро-, кардиотоксическим действием.
Наиболее активные фракции экзотоксина:
ü лецитиназа С
ü гемолизин
ü коллагеназа
ü гиалуронидаза
ü мутоксин (разрушает ДНК клеток)
ü фибринолизин
ü нейрамидаза
ü геммагглютинин
Этот вид раневой инфекции является наиболее опасным для жизни осложнением ран любого происхождения.
Морфология и культивирование
Возбудители газовой гангрены — палочковидные грамположительные бактерии (отдел Firmicutes), образующие овальные споры, в диаметре превышающие поперечник вегетативной части. В пораженных тканях клостридии газовой гангрены формируют капсулу. Культивируются на жидких и плотных питательных средах в анаэробных условиях.
Факторы патогенности
Продуцируют экзотоксины, специфические для каждого вида, воздействующие на ЦНС; выделяют ферменты (коллагеназу, гиалуронидазу, дезоксирибонуклеазу), разрушающие соединительную ткань, а также гемолизин, разрушающий эритроциты.
Резистентность и экология
Вегетативные формы клостридии чувствительны к кислороду, солнечному свету, высокой температуре, кислотам, дезинфицирующим средствам. Споры в противоположность вегетативным формам устойчивы к высоким температурам, кислотам и другим физическим и химическим факторам.
|
|
|
Возбудители газовой гангрены, являясь нормальными обитателями кишечника животных и человека, с фекалиями попадают в почву, где споры длительное время сохраняются. В некоторых почвах клостридии могут размножаться.
Иммунитет
Перенесенная инфекция не создает иммунитета. Ведущая роль в защите от Токсина принадлежит антитоксическому иммунитету.
Микробиологическая диагностика
Бактериоскопическое исследование
Проводится путем микроскопии мазков, приготовленных из отечной жидкости или некротизированной ткани. Наличие в препаратах крупных грамположительных палочек, часть из которых образует капсулу, позволяет поставить предварительный диагноз.
Материал вносят в несколько пробирок со средой Китта—Тароцци, со средой Вильсона-Блера и молоком. Часть пробирок прогревают при 800С в течение 30 мин для уничтожения неспорообразующих бактерий. Посевы инкубируют в обычном термостате при 37°С. C. perfringens растет в глубине среды. В молоке уже через 3—4 часа после посева образуется губкообразный сгусток, содержащий пузырьки газа и отделившуюся прозрачную жидкость. На следующие сутки на среде Китта-Тароцци отмечается помутнение и газообразование, а на среде Вильсона-Блера несколько позднее появляются черные колонии в глубине агарового столбика. Из всех посевов делают мазки, окрашивают их по Грамму и микроскопируют.
|
|
|
При положительном результате обнаруживают крупные грамположительные палочки C. perfringens. Для получения чистой культуры делают пересевы на сахарно-кровной агар в чашки Петри, которые инкубируют в строго анаэробных условиях при 370С в течение 3-4 дней. Выросшие колонии пересевают в пробирки со средой Китта-Тароцци, затем производят идентификацию на основании дифференциальных признаков.
Для определении токсигености исследуемую культуру, выращенную на среде Кита-Тароцци, центрифугируют и надосадочную жидкость вводят морской свинке, которая при положительном результате погибает.
Для быстрого обнаружения токсина C. perfringens в раневом отделяемом определяют его лецитиназную активность. Положительная реакция на лецитиназу выявляется помутнением жидкости в пробирке. При отрицательной реакции, характеризующейся нейтрализацией фермента соответствующей антисывороткой, жидкость остается прозрачной.
|
|
|
Вследствие того, что токсины разных видов клостридий различаются по своим антигенным свойствам, их серологическую идентификацию проводят в реакции нейтрализации на лабораторных животных. С этой целью смесь исследуемого токсина с антитоксической сывороткой (C. perfringens или С. novyi) вводят подкожно морской свинке. В случае нейтрализации токсина животное остается живым; при отрицательной реакции морская свинка погибает через 30 мин—4ч после инъекции.
Возбудитель столбняка
Столбняк (tetanus) — тяжелая раневая инфекция, вызываемая Clostridium tetani, характеризующаяся поражением нервной системы, приступами тонических и клонических судорог. Возбудитель столбняка открыт в 1884 г. Э. Николайером и С. Китазато.
Морфология и культивирование
Столбнячная палочка — строгий анаэроб, грамположительна, ее размеры 0,5—1,7x2—18 мкм; перитрих, образует терминально расположенную круглую спору, продуцирует сильный экзотоксин при выращивании на жидких питательных средах. На плотных питательных средах формирует прозрачные или слегка сероватые колонии с шероховатой поверхностью; не расщепляет углеводов, обладает слабыми протеолитическими свойствами.
|
|
|
Антигенная структура
По Н-антигену С. tetani делят на 10 сероваров. О-Антиген является общим для всех представителей вида. Все серовары продуцируют однородный токсин, нейтрализующийся иммунной сывороткой против токсина любого серовара.
Факторы патогенности
Основным фактором патогенности является экзотоксин. Столбнячный токсин представляет собой белок с молекулярной массой около 150 кД. Состоит из тетанолизина и тетаноспазмина, оказывающих гемолитическое и спастическое действие. К столбнячному токсину чувствительны человек, мыши, морские свинки, кролики и другие животные.
Резистентность и экология
С. tetani распространен повсеместно. Являясь нормальным обитателем кишечника человека и животных, он попадает в почву, где в виде спор может сохраняться годами, десятилетиями. Столбнячная палочка весьма устойчива к дезинфектантам. При кипячении споры погибают через 50—60 мин.
Иммунитет
После перенесенной болезни иммунитет не вырабатывается. От матери, вакцинированной против столбняка, новорожденным передается непродолжительный пассивный антитоксический иммунитет.
Микробиологическая диагностика
Материал для исследования: кусочки ткани вокруг предполагаемых входных ворот инфекции, гной, перевязочный материал, кетгут. При подозрении на столбняк у женщин после родов или аборта — выделения из матки.
Бактериологическое исследование
Материал засевают в среду Китта—-Тароцци и инкубируют в анаэробных условиях при 37°С в течение 3—4 сут., наблюдая придонный рост бактерий. Затем делают посевы на сахарный агар в чашки Петри, в столбик сахарного питательного агара в пробирке. Посевы также инкубируют в анаэробных условиях.
На поверхности кровяного агара Cl. tetani образует нежные прозрачные колонии, окруженные малозаметной зоной гемолиза. Для получения чистой культуры подозрительные колонии пересевают в пробирки со средой Китта—Тароцци и сохраняют их под слоем вазелинового масла или в эксикаторе, заполненном смесью инертных газов.
Биопроба — основной метод лабораторной диагностики столбняка. Проводится для обнаружения столбнячного токсина в исследуемом материале. С этой целью материал растирают в стерильной ступке с песком, заливают изотоническим раствором хлорида натрия для экстрагирования токсина и фильтруют через бумажный фильтр. Часть фильтрата смешивают с антитоксической сывороткой и внутримышечно вводят белым мышам (контрольная группа), подопытным животным вводят один фильтрат. Через 1—2 сут у мышей появляется ригидность мышц хвоста и задних конечностей. В результате резкого сокращения хвостовых мышц хвост поднимается в виде дуги. Затем подопытные животные погибают. Для определения токсигенности выделенной культуры белым мышам вводят надосадочную жидкость, полученную при центрифугировании этой культуры, выращенной на жидкой питательной среде.
Биохимические свойства
В отличие от других патогенных клостридий возбудитель столбняка характеризуется слабой биохимической активностью: не сбраживает моносахариды и многоатомные спирты. Однако некоторые штаммы могут ферментировать глюкозу в зависимости от концентрации в среде ионов железа. Столбнячная палочка обладает слабыми протеолитическими свойствами, вызывая медленную ферментацию протеинов и пептонов до аминокислот, которые затем разлагаются с образованием угольной кислоты, водорода, аммиака, летучих кислот и индола.
Возбудитель ботулизма
Ботулизм – инфекционная болезнь, характеризующаяся интоксикацией организма с преимущественным поражением ЦНС, возникающее в результате употребления пищевых продуктов, содержащих токсины Clostridium botulinum. Clostridium botulinum был выделен в 1896 г. Э. Ван-Эрменгемом из организма погибшего и остатков колбасы (лат. botulus — колбаса), употребление которой привело к смерти.
Таксономия
Возбудитель ботулизма относится к отделу Firmicutes, роду Clostridium.
Морфология и тинкториальные свойства
Возбудители ботулизма имеют форму палочек длиной 3—9 мкм, шириной 0,6—1 мкм с закругленными концами. Палочки образуют субтерминально расположенные споры и имеют вид теннисной ракетки. Капсулы не образуют, перитрихи. Грамположительны.
Культивирование
С. botulinum — строгий анаэроб. Оптимальная температура для роста 25—35 °С, рН среды 1,2—1,А. На кровяном агаре образует небольшие прозрачные колонии, окруженные зоной гемолиза. В высоком столбике сахарного агара колонии имеют вид пушинок или зерен чечевицы.
Ферментативная активность
С. botulinum обладает большим набором сахаролитических и протеолитических ферментов.
Антигенные свойства
Наиболее важными для идентификации возбудителя, обладает экзотоксин С. botulinum. Различают 7 сероваров возбудителя ботулизма — А, В, С, D, E, F, G, из которых наиболее распространены А, В, Е.
Факторы патогенности
С. botulinum выделяет экзотоксин, самый сильный из всех биологических ядов. Смертельная доза для человека равняется 0,3 мкг. Ботулинический экзотоксин оказывает нейротоксическое, гемагглютинирующее действие. Его особенностью является высокая устойчивость к нагреванию (сохраняется в течение 10—15 мин при 100°С), кислой реакции, высоким концентрациям поваренной соли, замораживанию, пищеварительным ферментам.
Резистентность
Споры С. botulinum обладают очень высокой резистентностью к высоким температурам (выдерживают кипячение в течение 3—5 ч).
Эпидемиология
Возбудитель ботулизма широко распространен в природе. Его обнаруживают в организме животных, рыб, ракообразных, откуда он попадает в почву и воду. В почве С. botulinum долгое время сохраняется в виде спор и даже может размножаться, что позволяет отнести ботулизм к сапронозным инфекциям. Путь передачи инфекции — пищевой. Чаще всего фактором передачи инфекции являются консервы (грибные, овощные, мясные, рыбные).
Микробиологическая диагностика
Материалом для выявления ботулотоксина служат сыворотка крови, моча, испражнения, промывные воды желудка больного, остатки пищи или подозреваемые продукты (колбасы, мясные, рыбные, фруктовые, овощные консервы и др.). Для обнаружения ботулотоксина в сыворотке крови больного ставят РПГА с эритроцитами, нагруженными моновалентными антитоксическими противоботулиническими сыворотками типов А, В, Е. В качестве контроля берут нормальную сыворотку крови. Обнаружение ботулотоксина в пищевых продуктах и определение токсигенности С. botulinum проводят в реакции нейтрализации токсина на белых мышах.
Для определения серотипа токсина реакцию ставят с моновалентными сыворотками типов А, В, Е. При нейтрализации токсина гомологичной антитоксической сывороткой мыши остаются живыми.
Дата добавления: 2019-11-25; просмотров: 198; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!