Определение рН вагинального отделяемого
В норме водородный показатель вагинального отделяемого, характеризующий его кислотность, составляет 3,8-4,5.
В процессе метаболизма лактобактерий при расщеплении гликогена эпителия влагалища образуется молочная кислота. При нарушении механизма метаболизма лактобактерий происходит их гибель и сдвиг pH влагалищных выделений в сторону щелочной реакции (более 4,5), которая приводит к росту анаэробных бактерий.
Определение рН вагинального содержимого проводится с помощью различных модификаций рН-метров или с использованием универсальной индикаторной бумаги (лакмусовая бумажка), которые вводятся во влагалище или помещаются непосредственно в каплю влагалищных выделений, нанесенных на предметное стекло.
Во избежание ошибок в клиническом диагнозе обследование на БВ не проводят во время менструации, в течение 2-3 дней после полового сношения (сперма может изменять рН вагинального отделяемого), а также на фоне использования антибактериальных и гормональных препаратов. Чувствительность и специфичность этого метода составляют 89 и 85% соответственно .
Аминотест
Вагинальное содержимое в 50% случаев имеет запах «тухлой рыбы», который является результатом выработки диаминов в процессе реакции декарбоксилирования аминокислот облигатными анаэробными бактериями. Соли этих соединений превращаются в летучие амины при щелочном значении рН.
Запах «тухлой рыбы», вызываемый алкилированием влагалищного содержимого, свидетельствует о наличии летучих аминов, таких как кадаверин, триметиламин, путресцин, тирамин, изобутиламин, являющихся продуктами жизнедеятельности неспорообразующих анаэробных бактерий. Вместе с тем, G. vaginalis, выделяемые при БВ, не продуцируют эти соединения. Поэтому в случае полного доминирования G. vaginalis в составе вагинального микробиоценоза аминотест будет отрицательным.
|
|
|
При проведении аминотеста в каплю вагинального содержимого, нанесенного на хорошо обезжиренное предметное стекло, вносится равное количество 10% раствора КОН. При положительном аминотесте определяется запах «тухлой рыбы».
Тест на наличие специфического запаха субъективен, поскольку его результаты подвержены искажению в связи с индивидуальными особенностями личного восприятия процедуры непосредственным исполнителем. Тем не менее чувствительность и специфичность этого диагностического теста составляют 79 и 97% соответственно .
Микроскопическое исследование
Микроскопическое исследование с целью выявления «ключевых клеток» проводится непосредственно во время гинекологического осмотра. Мазок из влагалища наносится на хорошо обезжиренное предметное стекло, равномерно распределяется тонким слоем на его поверхности, накрывается покровным стеклом и просматривается с использованием световой микроскопии при увеличении в 400 раз. Чувствительность микроскопического метода диагностики составляет 93%, а специфичность - 70%.
|
|
|
Кроме диагностики БВ микроскопический метод имеет важное диагностическое значение в выявлении относительно редких в репродуктивном возрасте женщины состояний вагинальной микроэкологии: цитолитического вагиноза, промежуточной формы микробиоценоза, вагинальной эпителиальной атрофии (последняя характерна для менопаузы).
Формирование «ключевых клеток» происходит в случае увеличения колонизации G. vaginalis и последующей их адгезии на клетки вагинального эпителия. «Ключевые клетки» представляют собой отторгшиеся от эпителиальной выстилки интактные или литически измененные клетки, колонизированные G. vaginalis. G. vaginalis покрывают всю поверхность эпителиальных клеток в виде облака или вуали, а в наиболее клинически выраженных случаях заполняют собой все межклеточное пространство.
Однако следует помнить, что выявление «ключевых клеток» при микроскопическом исследовании влажного неокрашенного мазка увеличивает вероятность получения ложноположительного результата, так как часто «ложноключевые клетки» (эпителиальные клетки с адгезированными на них лактобактериями) отождествляют с истинными, что ведет к гипердиагностике БВ.
|
|
|
Более достоверную информацию можно получить при микроскопическом исследовании вагинальных мазков, окрашенных по методу Грама, когда «ключевые клетки» легко дифференцировать с «ложноключевыми клетками». Кроме того, отношение микроорганизмов к окрашиванию по Граму имеет большое диагностическое значение.
Окраска по Граму относится к сложному способу окраски. При сложных способах окраски на мазок воздействуют двумя красителями, из которых один является основным, а другой - дополнительным. Кроме красящих веществ при сложных способах окраски используют различные обесцвечивающие вещества: спирт, кислоты и т.д.
Особенностью окраски по Граму является неодинаковое отношение микроорганизмов к красителям трифенилметановой группы: генциановому, метиленовому или кристаллическому фиолетовому. Микроорганизмы, входящие в группу грамположительных, например стафилококки, стрептококки, дают прочное соединение с указанными красителями и йодом. Окрашенные микроорганизмы не обесцвечиваются при воздействии на них спиртом, вследствие чего при дополнительной окраске фуксином грамположительные микроорганизмы не изменяют первоначально принятый фиолетовый цвет. Грамотрицательные микроорганизмы (бактероиды, фузобактерии и др.) образуют с генциановым кристаллическим или метиленовым фиолетовым и йодом легко разрушающиеся под действием спирта соединения, в результате чего они обесцвечиваются и затем окрашиваются фуксином, приобретая красный цвет.
|
|
|
Мазки исследуют с помощью световой микроскопии при увеличении в 1000 раз с использованием масляной иммерсии. Качественная оценка микрофлоры влагалища включает дифференциацию всех морфотипов по их тинкториальным свойствам и морфологическим признакам. Различают морфотипы лактобактерий, фузобактерий, бактероидов, мобилункусов, лептотрихий, вейлонелл, гарднерелл, а также грамположительных кокков, колиформных палочек, дрожжевых грибов. В мазке могут быть обнаружены трихомонады и другие паразиты.
Оценку микроскопической картины проводят по критериям Шпигеля (Spigel) в модификации Ньюжента (Nagent) .
При просмотре не менее 10 полей зрения подсчитывают среднее количество бактерий, принадлежащих к разным морфотипам. Каждому количеству бактерий определенного морфотипа присваивается определенный балл. Далее баллы суммируют и анализируют с использованием специальной стандартной шкалы:
- сумма баллов 0-3 соответствует нормоценозу;
- сумма баллов 4-6 соответствует промежуточной форме;
- сумма баллов более 7 соответствует БВ.
Микроскопическое исследование мазков из влагалища позволяет оценить:
- состояние вагинального эпителия (преобладают клетки поверхностного, промежуточного или парабазального слоя);
- исключить или подтвердить наличие «ключевых клеток» (поверхностные эпителиальные клетки, густо покрытые адгезированными на них мелкими грамвариабельными палочками, скрывающими границы клетки) или «ложноключевых клеток» (повышенная адгезия на эпителиальных клетках грамположительных палочек, чаще всего лактобактерий);
- лейкоцитарную реакцию (наличие, степень выраженности, проявления фагоцитоза, его завершенность);
- состав микрофлоры (количественная и качественная оценка по морфотипам и тинкториальным свойствам).
В нашей стране с учетом современных достижений клинической бактериологии и знаний инфекционной патологии женских половых органов для оценки микроскопической картины вагинального мазка в 1994 г. Е.Ф. Кира была разработана оригинальная классификация микроскопической характеристики биоценоза влагалища, в которой представлена микроскопическая характеристика четырех типов микробиоценоза влагалища и соответствующие каждому типу нозологические формы.
Вагинальный эпителий представлен клетками поверхностных слоев, реже встречаются клетки промежуточного слоя (соотношение может меняться в зависимости от фазы менструального цикла, у беременных много промежуточных клеток); «ключевые» клетки отсутствуют, иногда встречают «ложноключевые» клетки; лейкоцитарная реакция отсутствует или слабо выражена - единичные лейкоциты в поле зрения; общее количество микроорганизмов умеренное или большое; доминирующий морфотип - лактобактерии, другие морфотипы либо отсутствуют, либо их количество исчисляется единичными микробными клетками в редких полях зрения.
Промежуточный тип
Часто наблюдается у здоровых женщин репродуктивного возраста, редко сопровождается субъективными жалобами и клиническими проявлениями.
Вагинальный эпителий представлен поверхностными клетками; «ключевые клетки» единичные; количество лейкоцитов не более 10 в поле зрения; общее количество микроорганизмов умеренное или большое; доминируют морфотипы строгих анаэробов и гарднереллы в сочетании с умеренно сниженным титром лактобактерий.
Бактериальный вагиноз (микроскопия мазка, окрашенного по Граму).
Вагинальный эпителий представлен клетками поверхностных слоев, редко встречаются промежуточные клетки, часто - «ключевые» клетки .
«Ключевые» клетки (микроскопия мазка, окрашенного по Граму).лейкоцитарная реакция, как правило, отсутствует; общее количество микроорганизмов массивное, реже - большое; преобладают морфотипы строгих анаэробов и гарднереллы, лактоморфотипы отсутствуют или определяются как единичные не во всех полях зрения.
Эпителиальные клетки в подавляющем большинстве подвергнуты цитолизу; в мазке преобладают элементы деструкции клеток - детрит, обнаженные ядра поверхностных и промежуточных клеток; лейкоциты отсутствуют или их количество не превышает 10 в поле зрения; микрофлора в большом количестве, представлена морфотипами типичных лактобактерий .
Кандидозный вагинит (микроскопия мазка, окрашенного по Граму).
Вагинальный эпителий преимущественно поверхностных слоев, но может быть много промежуточных и даже парабазальных клеток (пропорционально степени тяжести клинического течения заболевания); лейкоцитарная реакция от умеренной (10-15 лейкоцитов в поле зрения) до резко выраженной (30-50 и более лейкоцитов в поле зрения); общее количество микроорганизмов умеренное или большое; доминируют морфотипы лактобактерий, присутствуют дрожжевые клетки, фрагменты псевдомицелия с бластоспорами .
Сочетание бактериального вагиноза и кандидозного вагинита (микроскопия мазка, окрашенного по Граму).
Вагинальный эпителий преимущественно поверхностных слоев, присутствуют «ключевые» эпителиальные клетки; умеренная или выраженная лейкоцитарная реакция; общее количество микроорганизмов массивное или большое; доминируют морфотипы строгих анаэробов и гарднереллы, присутствуют дрожжевые клетки и/или фрагменты псевдомицелия гриба; лактоморфотипы отсутствуют или видны единичные в поле зрения.
Неспецифический вагинит (микроскопия мазка, окрашенного по Граму).
Вагинальный эпителий представлен поверхностными и промежуточными клетками, при выраженном воспалительном процессе встречаются парабазальные клетки; наблюдается в разной степени лейкоцитарная реакция (более 10 лейкоцитов в поле зрения); общее количество микроорганизмов умеренное; лактобактерии отсутствуют или их количество резко снижено (до единичных в поле зрения); преобладают морфотипы условно-патогенных микроорганизмов - колиформные палочки или грамположительные кокки.
При обнаружении гонококков, трихомонад, мицелия, псевдогиф, спор выставляется соответствующий этиологический диагноз - гонорея, трихомониаз, микотический (грибковый) вагинит.
Вагинальная эпителиальная атрофия (микроскопия мазка, окрашенного по Граму).
В зависимости от степени атрофии слизистой оболочки влагалища эпителий представлен различным соотношением числа промежуточных и парабазальных клеток, по мере нарастания атрофии увеличивается число парабазальных и базальных клеток; количество лейкоцитов обычно не превышает 10 в поле зрения; микрофлора практически отсутствует; можно встретить единичные лактоморфотипы или морфотипы условно-патогенных микроорганизмов в редких полях зрения.
Дата добавления: 2019-07-17; просмотров: 120; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!