Микробиологическая диагностика сальмонеллезов

Дата « »______202__

Протокол занятия 4. Тема:  Возбудители брюшного тифа и паратифов, сальмонеллезов. Возбудители холеры.

Семейство Enterobaсteriaceae (энтеробактерии).

Род Salmonella включает себя всего 2 вида – S. enterica и S. bongori. Патогенные представители относятся только к виду S. enterica.

Сальмонеллы чрезвычайно вариабельны в антигенном отношении. Известно более 2500 сероваров.

    Кауфман (1934) на основании результатов реакции агглютинации разных сальмонелл с набором сывороток разделил все сальмонеллы на группы и типы и предложил диагностическую схему их антигенной структуры. Сальмонеллы содержат два антигенных комплекса: О и Н, О-антиген - липополисахариднопротеиновый комплекс; Н-антиген связан со жгутиками – флагелин.

 Все сальмонеллы разделены на О-группы, известно более 60 О-групп, обозначаемых прописными буквами латинского алфавита (А, В, С, D, Е и т. д.). Н-антигены сальмонелл имеют две фазы и определяет серовар. Сочетание различных О- и Н-антигенов определяет антигенную структуру культур.

Возбудители Брюшной тиф и паратифы А и В

           Salmonella typhi,

         Salmonella paratyphi А

         Salmonella schottmuelleri.

   Сальмонеллы сходны по морфологическим, культуральным и ферментативным свойствам, но отличаются по антигенной структуре.

      

 

Патогенез брюшного тифа (стадии)

 

1. Просветная

2. Инвазии

3. Бактериемии

4. Паренхиматозной диффузии

5. Выделительно-аллергическая

Микробиологическая диагностика брюшного тифа и паратифов

Выбор материала и метода микробиологической диагностики этих заболеваний зависит от стадии патогенеза. На первой неделе заболевания и в течение всего лихорадочного периода возбудитель можно выделить из крови (гемокультура), с конца второй и на третьей неделе — из мочи (уринокультура) и испражнений (копрокультура). При исследовании костного мозга (выделение миелокультуры). В скарификате розеол (розеоло-культура), в ликворе, содержимом две­надцатиперстной кишки, секционном материале. У реконвалесцентов исследуют испражнения и желчь (выделение биликультуры). Начиная со второй недели заболевания проводят серологи­ческое исследование.

Бактериологическое исследование.

Выделение культуры Посев крови на среду Раппопорт, испражнений, мочи и др. на среду Плоскирева, Эндо, висмут-сульфит агар ВСА) и среды накоп­ления (селенитовая, магниевая, Мюллера).

Идентификация культуры.

По культуральным свойствам. На 2 средах Плоскирева, МакКонки или Эндо вырастают бесцветные (лактозоотрицательные) колонии, а  на висмут-сульфит-агаре – черные. Колонии сальмонелл па­ратифа А окрашены взеленый цвет, так как  не образуют сероводород.

Морфологическим: Гр -.

Ферментативным: на среде Ресселя или Олькеницкого (окрашивание столбика среды Ресселя в синий цвет, среды Олькеницкого в желтый в результате ферментации глюкозы в анаэробных условиях; отсутствие ферментации лактозы)  

Антигенным: Ставят ориентировочную, а потом развернутую РА. Ориентировочную РА ставят со смесью и моно- О-сыворотками, и агглютинируют с Н-сыворотками с целью антигенной идентификации патогенных сальмонелл.

Выделенные культуры подвергают фаготипированию, что позволяет установить источник и пути заражения.

Серологическое исследование. Для серологической диагности­ки брюшного тифа и паратифов ставят ре­ акцию Видаля (развернутая РА) с целью определения соответствующих антител в крови больного. Антитела к возбудителям брюшного тифа, парати­фов А и В обнаруживаются в сыворотке крови больных с 8— 10-го дня заболевания.

Более чувствительны РНГА с эритроцитарными групповыми (А, В, С, Д, Е)и монорецепторными диагностикумами, а также ИФА, которые ставят с парными сыворотками в динамике заболевания.

Vi -антитела чаще обнаруживаются у бактерионосителей сальмонелл брюш­ного тифа, т.к. Vi-антиген способствует длительной персистенции возбудителя в организме. При обследовании лиц, подозрительных на носительство брюшнотифозных палочек, применяется РНГА с эритроцитарным Vi-диагностикумом для определения соответствующих антител и их принадлеж­ности к классу IgG.

Изучать биопрепараты, используемые для диагностики, ле­чения и профилактики тифо-паратифозных заболеваний:

- диагностикумы (взвеси убитых бактерий) для постановки реакции агглютинации (Видаля) брюшнотифозные О и Н, паратифозные А и В ОН с целью определения антител в крови больного;

- эритроцитарный Vi -диагностикум - взвесь эритроцитов, конъюгированных с Vi-антигеном S . typhi . Используется для постановки реакции непрямой Vi- гемагглютинации с целью и выявления  бактерионосительства;

- сальмонеллезные групповые адсорбированные и монорецепторные О- и Н- агглютинирующие сыворотки для определения антигенной структуры сальмонелл с помощью РА

- типовые сальмонеллезные бактериофаги для фаготипирования сальмонелл

- брюшнотифозные вакцины. На протяжении ряда лет для профилактики брюшного тифа используются убитые цельноклеточные брюшнотифозные вакцины, которые заменяют в нестоящее время живой оральной или полисахаридной вакцинами. Одна из них - ВИАНВАК, обогащенная хроматографически чистым полисахаридным Vi-ан­тигеном, для профилактики брюшного тифа. Разработана также живая пероральная брюшнотифозная вакцина. Кроме того, в России зарегистрирована вакцина ТИФИМ Ви производства французской фирмы Авентис Пастер, приготовленная на основе полисахарида, выделенного из бактерий Salmonella typhi.

- поливалентный брюшнотифозный бактериофаг (таблетки с кислотоустойчивым покрытием) для экстренной профилактики брюшного тифа.

 

 

Микробиологическая диагностика сальмонеллезов

 

Основными воз­будителями сальмонеллеза являются Salmonellaсероваров enteritidis , t yphimurium , choleraesuis , haifa и т.д.

 

Биопроба. Материалом от больного производят   пероральное заражение белых мы­шей, которые через 1-2 дня погибают от септицемии. При посеве крови из сердца и материала из внутренних органов выделяется культура сальмонелл.

Бактериологический метод

Выделение возбудителя : на среде Левина

Идентификация выделенной культуры возбудителя :

по биохимическим свойствам - определение биохимической активности изучаемой культуры по "пестрому" ряду Гисса (расщеп­ление глюкозы, отсутствие расщепления лактозы и сахарозы).

- по антигенным свойствам – учет ориентировочной реакции агглютинации на стекле с диагностическими монорецепторными сальмонеллезными агглютинирующими О- и Н сыворотками в соответствии со схемой Кауфмана-Уайта;

- по фаголизабельности

- Определение чувствительности выделенной культуры к ан­тибиотикам методом бумажных дисков

Серологическое исследование - исследование с помощью РНГА парных сывороток крови больных, взятых с интервалом в 7-10 дней с сальмонеллезными поливалентными и группо­выми (группы А, В, С, Д, Е)диагностикумами. Диагностическое зна­чение имеет повышение титра антител в четыре и более раз.

---

Дата добавления: 2022-12-03; просмотров: 16; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

---

---

Мы поможем в написании ваших работ!