Принципы иммунохимических реакций
Лекция 20
Иммунобиологические препараты.
Иммуномодуляторы.
Иммуномодуляция – это своего рода коррекция процессов иммунитета. Все фармпрепараты, обладающие этим свойством, делят на иммуностимуляторы и иммунодепрессанты. Целесообразно выделить третью группу – собственно иммуномодуляторы, т.е. вещества, нормализующие функции иммунной системы.
Иммуностимуляторы – это средства, усиливающие иммунный ответ. К ним относятся лекарственные препараты, пищевые добавки, адъюванты и другие агенты биологической или химической природы, стимулирующие иммунные процессы.
Иммунодепрессанты – это средства, подавляющие иммунный ответ. К ним относят лекарственные препараты, обладающие иммунотропностью или оказывающие неспецифическое действие, а также другие агенты биологической или химической природы, угнетающие иммунные процессы.
Иммунномодуляторы – это лекартсвенные средства, обладающие иммунотропной активностью, которые в терапевтических дозах восстанавливают функции иммунной системы.
Практически все природные вещества, способные воздействовать на иммунитет, можно подразделить на экзогенные и эндогенные иммуномодуляторы.
Большинство экзогенных иммуномодуляторов – вещества микробного происхождения, в основном бактериального и грибкового. Известны препараты растительного происхождения (экстракт коры мыльного дерева, полисахарид из проростков картофеля).
|
|
|
Вешества эндогенного происхождения условно можно подразделить на две группы: иммунорегуляторные пептиды и цитокины.
Иммунорегуляторные пептиды, или цитамины, являются в основном экстрактами из органов иммунной системы (тимуса, селезенки). Или продуктами их жизнедеятельности (костного мозга).
Под цитокинами понимают всю совокупность биологически активных белков, продуцируемых лимфоцитами и макрофагами: интерлейкины, монокины, интерфероны. В иммунотерапии они используются в виде рекомбинантных препаратов.
Существуют три основные группы заболеваний иммунной системы: иммунодефициты, аллергические и аутоиммунные процессы, при которых показана иммуномодулирующая терапия. Особенно целесообразно назначение иммуностимуляторов при вторичных или приобретенных иммунодефицитах, которые часто проявляются в виде инфекционного процесса.
При аллергических заболеваниях спользование иммуномодуляторов целесообразно в тех случаях, когда эти заболевания осложнены какими – либо проявлениями вторичной иммунологической недостаточности: бронхиальная астма с явлениями хронического гнойно – обструктивного бронхита.
|
|
|
При аутоиммунных заболеваниях, иммунодепрессанты применяются довольно широко для подавления воспалительного процесса.
В настоящее время в учении об иммуномодуляторах происходит смена эмпирического подхода более научно обоснованным, что отражается:
· В применении вместо микробных клеток или грубых экстрактов из лимфоидных органов химически чистых синтетических аналогов Биологически активных природных веществ.
· В использовании синтетических иммуномодуляторов, не имеющих природных аналогов.
· В применении рекомбинантных цитокинов – естественных регуляторов иммуногенеза.
· В поиске веществ, которые с той или иной степенью специфичности действуют как индукторы естественных регуляторов иммуногенеза – цитокинов.
· В направленном синтезе новых химических соединений, обладающих тропностью по отношению к иммунной системе.
Теоретические основы иммунопрофилактики.
Иммунный ответ на введение антигена всегда строго специфичен. Кроме того, один и тот же антиген вызывает иммунный ответ различной интенсивности – от слабого или даже нулевого до очень сильного – в соответствии с генотипом человека. Однако один и тот же организм обладает различной реактивностью по отношению к антигенам. Это связано с тем, что специфический иммунный ответ регулируется генами иммунной реакции, сцепленными с главной генетической системой гистосовместимости.
|
|
|
При проведении вакцинопрофилактики необходимо учитывать следующее:
1. получение напряженного и длительного иммунитета обеспечивается путем повторного введения вакцинных препаратов.
2. для поддержания защитного уровня специфического иммунитета при проведении активной иммунизации большое значение имеет схема введения вакцинного препарата с определенными интервалами.
3. иммунный ответ на вакцинацию строго специфичен и индивидуален. Активная иммунизация не обеспечивает развития у всех прививаемых одинаковой невосприимчивости. Существуют группы людей, которые в силу тех или иных обстоятельств не способны к полноценной выработке антител.
4. наиболее эффективный искусственный иммунитет можно получить к тем инфекциям, после которых создается достаточный естественный иммунитет.
5. активная иммунизация приводит к выработке специфических антител только после определенного периода времени, поэтому ее применение целесообразно в профилактических целях.
|
|
|
Принципы иммунохимических реакций
Комплекс «антиген – антитело» образуется при взаимодействии чужеродных для нашего организма веществ с защитными белками сыворотки крови (антителами). Поэтому такие реакции называют также серологическими (serum – сыворотка).
Существуют два вида постановки иммунохимических реакций, используемых в диагностике:
1. Для выявления количества или титра антител в сыворотке крови с помощью известного антигена (серодиагностика). В качестве стандартного антигена применяется диагностикум.
2. Для обнаружения и идентификации антигенов в биологических жидкостях при помощи известных антител (серотипирование). В качестве препарата, содержащего антитела используются диагностические сыворотки.
Общие закономерности иммунологических методов:
· исследование проводится in vitro (в пробирке);
· проявляется при иммунологическом соответствии (гомологичности) антигена и антитела;
· протекают в две фазы (невидимая и видимая).
Для количественной характеристики иммунологических методов исследования используют такие понятия, как чувствительность и специфичность.
Чувствительность = число положительных реакций у истинных больных * 100%
Число обследованных больных с подтвержденным диагнозом
Специфичность = число отрицательных реакций в контрольной группе * 100%
Число обследованных в контрольной группе
Все иммунологические методы можно разделить на три группы:
1). Основанные на прямом взаимодействии антигена с антителом (феномены агглютинации, преципитации, гемагглютинации, иммобилизации и др.)
2). Основанные на опосредованном взаимодействии антигена с антителом (реакции непрямой агглютинации, коагглютинации, латекс – агглютинации, угольной агломерации, связывания комплемента и др.)
3). С использованием меченых антител или антигенов (флюоресцирующих антител, иммуноферментного, радиоиммунного анализа и других методов).
II. Агглютинационные тесты.
Реакция агглютинации (РА) основана на взаимодействии поверхностных антигенов бактерий и других корпускулярных частиц с антителами и протекает в две фазы:
1. специфическая фаза – связывание детерминантной группы (эпитопа) антигена с паратопом – активным центром иммуноглобулина (невидимая фаза).
2. неспецифическая (видимая фаза) – образующийся комплекс (АГ+АТ) утрачивает растворимость и выпадает в осадок в виде хлопьев. Однако это явление возможно лишь в электролитной среде – 0,85% раствора натрия хлорида.
Реакцию агглютинации можно применять для обнаружения специфических антител в сыворотке крови или при помощи стандартной агглютинирующей сыворотки можно идентифицировать выделенные микроорганизмы.
Развернутая реакция агглютинации для выявления специфических антител в сыворотке крови больного ставится в пробирках или лунках полистироловых планшетов. У больного (до приема пищи) берется кровь из вены в чистую пробирку, и выдерживается при комнатной температуре около часа. Стеклянной палочкой образовавшийся сгусток крови отделяется от желтоватой жидкости – сыворотки, которую отсасывают в стерильную пробирку и хранят при температуре 4ºС до использования.
Во все пробирки (7 штук) наливают по 0,5 мл физиологического раствора. В первую пробирку вносят 0,5 мл сыворотки – получается сыворотка разведением 1 : 2. Отсюда 0,5 мл смеси переносят во вторую пробирку – получается сыворотка разведением 1 : 4, и т.д. Из последней пробирки 0,5 мл смеси удаляют в дезинфицирующий раствор. Затем во все пробирки вносят по 1 капле диагностикума (взвесь убитых или живых бактерий), встряхивают и оставляют при комнатной температуре или инкубируют при 37ºС на 18 – 20 часов. Обязательные контроли – сыворотка без диагностикума и диагностикум без сыворотки.
При положительном результате реакции на дне пробирки виден осадок в виде «перевернутого зонтика», а при отрицательном – осадок в виде «пуговицы».
Ориентировочная реакция агглютинации служит для предварительного определения вида микроба. На стекло наносят каплю узкоспецифичной адсорбированной сыворотки (содержащей только специфические антитела). Сыворотку наносят в разведении 1 : 100 и рядом – каплю физиологического раствора (контроль). Исследуемую культуру микроба петлей вносят в обе капли и размешивают. Через 2 - 4 минуты учитывают результат. При положительной реакции (соответствии исследуемой культуры диагностической сыворотке) наблюдается скучивание бактерий в виде хлопьев на фоне прозрачной жидкости. В контроле – равномерная муть. Реакцию ставят перед постановкой развернутой РА для идентификации микроба.
Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) заключается в том, что молекулы антигена адсорбируются на поверхности эритроцитов. Такие «нагруженные» антигенами эритроциты приобретают способность агглютинироваться иммунной сывороткой, специфичной для данного антигена. Эритроциты склеиваются и выпадают в осадок, образуя на дне пробирки гемагглютинат в виде перевернутого зонтика.
Реакция преципитации. В ней участвуют мелкодисперсные антигены (преципитиногены), которые связываются с соответствующими антителами (преципитинами). Чаще всего эту реакцию применяют для выявления антигенов по известной иммунной преципитирующей сыворотке, содержащей антитела – преципитины. Это качественный метод исследования. В узкую преципитационную пробирку добавляют стандартную иммунную сыворотку и на нее осторожно наслаивают жидкость, содержащую определяемый антиген. Появление на границе двух жидкостей кольца (преципитина) свидетельствует о наличии антигена (например, возбудителя сибирской язвы в реакции Асколи) в исследуемой жидкости. Преципитат возникает вследствие укрупнения коллоидных частиц антигена. Иногда эту реакцию называют кольцепреципитацией. Важным условием образования нерастворимого комплекса антиген – антитело является:
1. полная прозрачность жидкостей,
2. эквивалентное соотношение ингредиентов, так как образующийся комплекс растворяется в избытке антигена или антитела.
III. Вакцины и сыворотки.
Токсинообразование у микроорганизмов:
| Выделяют экзотоксин | Образуют эндотоксин |
| Clostridium tetanus | Escherichia coli |
| Clostridium perfringens | Salmonella typhi abdominalis |
| Clostridium botulinus | Shigella flexneri |
| Clostridium diphtheriae | Neisseria meningitidis |
Среди препаратов различают:
1. вакцины и анатоксины – препараты вызывающие в организме специфический иммунный ответ с формированием активного противоинфекционного иммунитета за счет мобилизации механизмов иммунологической памяти;
2. иммунные сыворотки и иммуноглобулины – препараты, содержащие готовые специфические антитела (иммуноглобулины), введение которых в организм приводит к немедленному приобретению пассивного гуморального иммунитета, способного защитить организм от интоксикации или инфекции.
Иммунные сыворотки и иммуноглобулины.
Иммунные сыворотки и получаемые из них иммуноглобулины – биологические препараты, содержащие антитела. Они предназначены для создания пассивного антитоксического, антибактериального или антивирусного иммунитета у человека, нуждающегося в защите от инфекции или других потенциально – опасных веществ, обладающих антигенными свойствами.
Все сывороточные препараты делятся на две группы: гетерологичные, полученные из крови животных, и гомологичные, полученные из крови человека. Эти различия имеют принципиальное значение, так как гетерологичные препараты являются для организма человека чужеродными антигенами. Их применение сопровождается развитием антител, которые могут не только нейтрализовать действие препарата, но и вызвать в организме тяжелые аллергические и иммунокомплексные реакции.
Классификация вакцин
| Группа вакцин по способам приготовления | Бактериальные вакцины | Вирусные вакцины |
| Живая (аттенуированная) | Туберкулезная – BCG Чумная Сибиреязвенная Туляремийная Бруцеллезная | Коревая Антирабическая Оспенная Паратитная Полиомиелитная I, II и III типов. Против желтой лихорадки. |
| Инактивированная | Лептоспирозная Коклюшная Гонококковая Бруцеллезная | Гриппозная Против клещевого энцефалита |
| Анатоксин | Стафилококковый Дифтерийный (АД) Столбнячный (АС) Секстаанатоксин Комбинированные препараты: дифтерийно - столбнячный (АДС), коклюшно – дифтерийно – столбнячный (АКДС) | |
| Химическая (субъединичная) | Сыпно-тифозная Холерная (холероген + О-антиген) Менингококковая Брюшнотифозная | Гриппозная и др. |
| Рекомбинантная | Гриппозная и др. | |
| Генно – инженерная | Против гепатита В |
Дата добавления: 2022-12-03; просмотров: 27; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!