Порядок оформления и отправки сопроводительных документов к материалу, направляемому на исследование.
Исследования крови проводимые для исследования на лейкоз.
1Бактериологическое исследование крови проводят по методу А.С. Троицкой.
Стерильно из яремной вены в специально смонтированную пробирку, в которую предварительно вносим 5 мл мясопептонного бульона, берут 1 -2 мл крови, затем добавляем среду следующего состава: стерильного физиологического раствора 1 л, нефтяного ростового вещества 0,001г, гибберелина, предварительного растворенного в 2 мл этилового спирта 0,01г глюкозы и нуклеиново - кислого натрия по 4г. Все компоненты смешиваются в стерильной колбе и стерилизуют в аппарате Коха при температуре 100 градусов 3 дня подряд по 1часу ежедневно. Добавляют 1 мл витамина B12. После добавления среды в пробирку с кровью посевы инкубируют при температуре 37 градусов в течение 5 – 10 дней, ежедневно просматривают их.
После инкубации делаем посев из пробирки в чашки Петри на твердую питательную среду (мясопептонный агар или среда, приготовленная из сухого питательного агара, в состав которой входит рыбный гидролизат и агар - агар). Для этого стерильной пастеровской пипеткой смешивают содержимое пробирки и 1 мл вносят в чашку Петри с агаром, равномерно распределяем по всей поверхности агара. И инкубируем в термостате. Через каждые 3 – 7 слепых пассажей до появления мелких колоний со слегка голубоватым оттенком. При микроскопировании мазков из этих посевов находим мелкие кокковидные зернистые палочковидной формы бактерии.
|
|
|
2.Иммунодиагностика лейкозов КРС. При постановке реакции в пробирки Флоринского заливали по 0,2 мл испытуемой сыворотки, к которой добавляли по 0,01 мл приготовленной взвеси лейкоцитов животного больного лейкозом. Для исключения спонтанной агглютинации лейкоцитов используем физиологический раствор смешивая его с взвесью лейкоцитов и сывороткой здорового животного. После 1,5 – 2 – часового контакта используемой сыворотки и взвеси лейкоцитов в термостате в каждую пробирку добавляем по 0,1 мл 1% - ного раствора уксусной кислоты для лизиса оставшихся эритроцитов. При учете реакции каплю наносили на предметное стекло и просматривали под микроскопом при малом увеличении.
При положительной реакции лейкоагглютинации отмечают склеивание клеток и скручивание их; при отрицательной – лейкоциты смеси равномерно распределялись по стеклу; в случаях сомнительной реакции склеивания клеток выражено нечетко.
По данным Е. Д. Пономаревой (1968), реакция кадмиевой пробы дает положительные результаты у 75 – 80% людей, больных лейкозами.
3.Методика постановки кадмиевой пробы, следующая: к 0,4 мл цельной сыворотки крови добавляют при легком встряхивании пробирки 4 капли 0,4% - ного раствора сернокислого кадмия. При положительной реакции через 1- 2 минуты отмечали образование желеобразного осадка, в сомнительных случаях наблюдали лишь помутнение сыворотки, а в отрицательных сыворотка с раствором кадмия оставалась прозрачной.
|
|
|
4.Микроскопическое исследование крови. Приготовление препарата « толстой капли » проводят по методу А. С. Троицкой ( 1959).
На чистое обезжиренное предметное стекло наносим каплю крови. Углом другого стекла ( круговыми движениями ) капля размазывается до размеров 15 – 25 мм в диаметре и высушивают под чашкой Петри. Затем эритроциты в мазке крови лизируем стерильной дистиллированной водой до молочного оттенка у мазка. Потом мазок высушивается в термостате при 36 – 38 градусах в течение 20 – 30 минут. После высушивания красят карболовым раствором метиленовой сини в течение 2 – 3 минут или по модифицированному методу Муромцева, приготовляя два раствора красок. В первый флакон вносят 10 г кристаллической карболовой кислоты, 0,15 г основного фуксина и 20 мл абсолютного этилового спирта. Во второй флакон – 2,5г метиленовой сини, 0,1г буры и 200 мл дистиллированной воды. Флаконы плотно закрываются пробками и выдерживают при комнатной температуре двое суток. Затем содержимое их фильтруют через бумажный фильтр в один флакон.
|
|
|
Окраска. Мазок крови покрывают кусочком фильтровальной бумаги и смачивают ее краской. Красят пять минут.
Мазки изучают под микроскопом с использованием иммерсионной системы при увеличении в 900 раз и более. Сферические кокковидные образования ( « глобоидные тельца ») окрашиваются в синий цвет и располагаются в цитоплазме лимфоцитов, реже в ядре, на поверхности оболочки клетки или вне клетки, одиночно, по два, а иногда некоторые лимфоциты как бы нафаршированы « глобоидными тельцами ».
Порядок оформления и отправки сопроводительных документов к материалу, направляемому на исследование.
На каждый отправляемый в лабораторию материал заполняют сопроводительный документ по формам, согласно приложениям № 1 и № 2 к настоящим правилам.
В сопроводительном письме указываются: вид, пол и возраст животного от которого взят материал для исследования, его номер или кличку, сколько банок с материалом, на какое исследование посылается материал, краткое описание клинических признаков и патологоанатомических изменений.
При посылке образцов корма указывают его название, дату взятия образца, с какого угодья. Если корм получен с завода или заготовительного пункта, следует указать, с какого именно.
|
|
|
При необходимости к письму прилагают дополнительные сведения, в частности, какая помощь оказана животному, какие лекарственные средства применялись, с какого времени скармливался корм животным и т. д. При отправке материала из рыбхозяйственного водоема указывают клинико – эпизоотологические данные.
К сопроводительному письму пробы ( мазки ) крови, направляемые в плановом порядке для серологического, гематологического исследования, прилагают опись проб в двух экземплярах.
Форма сопроводительного документа к патматериалу.
Приложение № 2.
Форма сопроводительного документа к пробам крови.
Дата добавления: 2022-01-22; просмотров: 59; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!