Разделение пигментов по Краусу
Метод основан на различной растворимости пигментов в спирте и бензине. Эти растворители при сливании не смешиваются и образуют две фазы — верхнюю бензиновую и нижнюю спиртовую, благодаря чему и происходит разделение компонентов смеси.
Ход работы.
В пробирку наливают 2—3 мл спиртового экстракта пигментов и добавляют 3— 4 мл бензина. Содержимое пробирки сильно встряхивают, предварительно закрыв ее пробкой или большим пальцем, и оставляют отстояться. По мере расслоения эмульсии бензиновый слой будет окрашиваться в зеленый цвет из-за лучшей растворимости в нем хлорофиллов. Кроме того, в бензин переходит каротин, но его окраска маскируется хлорофиллом. Ксантофилл остается в спиртовом слое, придавая ему золотисто-желтую окраску.
Если пигменты разделяются недостаточно четко, то добавляют 3—4 капли воды и снова встряхивают. При избытке воды возможно помутнение нижнего слоя. В этом случае следует прилить немного этилового спирта и взболтать содержимое пробирки.
В конце работы зарисовывают картину распределения отдельных пигментов, а в выводах объясняют их различную растворимость в спирте и бензине.
Омыление хлорофилла щелочью
Обрабатывая хлорофилл щелочью, можно вызвать омыление эфирных групп, т. е. отщепление остатков метилового спирта и фитола. Образующаяся при этом соль хлорофиллиновой кислоты сохраняет зеленую окраску и оптические свойства хлорофилла, но отличается большей гидрофилыюстью по сравнению с неизмененным пигментом.
|
|
|
Ход работы.
В пробирку с 2 - 3 мл спиртового раствора пигментов приливают 1 мл 20%-ной NaOH взбалтывают. После смешивания экстракта со щелочью пробирку помещают в кипящую водяную баню. Как только раствор закипит, пробирку вынимают и охлаждают. К охлажденному раствору добавляют равный объем бензина и несколько капель воды для лучшего разделения смеси. Затем содержимое пробирки резко встряхивают и дают ему отстояться.
В бензиновый слой перейдут каротин и ксантофилл, а в спиртовой раствор — натриевая соль хлорофиллиновой кислоты.
По окончании опыта зарисовывают окраску слоев, указав распределение пигментов.
Получение феофитина и обратное замещение водорода атомом металла
Как уже отмечалось ранее, хлорофиллы относятся к магний-порфиринам. Атом магния сравнительно слабо удерживается в порфирнновом ядре и при осторожном воздействии сильных кислот легко замещается двумя протонами, что приводит к образованию феофитина бурого цвета. Если на феофитин подействовать солями меди, цинка или ртути, то вместо двух протонов в ядро входит соответствующий металл и вновь восстанавливается зеленая окраска. Однако она несколько отличается отокраски хлорофилла. Следовательно, цвет хлорофиллов зависит от наличия металлоорганической связи в их молекуле.
|
|
|
Обратное введение магния в феофитин происходит с большим трудом.
Ход работы.
В две пробирки берут по 2 - 3 мл спиртовой вытяжки пигментов и прибавляют по 1 - 2 капли 10%-ной соляной кислоты. При взбалтывании зеленая окраска хлорофилла переходит в бурую, характерную для феофитина. Далее одну пробирку с феофитином оставляют для контроля, а во вторую вносят несколько кристалликов уксуснокислой меди и раствор нагревают на водяной бане до кипения. После нагревания бурый цвет раствора меняется на зеленый вследствие образования хлорофиллоподобного производного меди.
Зарисовывают окраску феофитина и медьпроизводного хлорофилла.
Материалы и оборудование:1) сухие листья; 2) этиловый спирт; 3) бензин; 4) 20%-ный раствор NaOH; 5) 10%-ная соляная кислота в капельнице; 6) уксуснокислая медь; 7) коническая колба с обратным холодильником; 8) водяная баня; 9) штатив с пробирками; 10) пипетки на 1 мл; 11) коническая колбочка; 12) цветные карандаши.
Дата добавления: 2021-04-05; просмотров: 345; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!