Порядок проведения лабораторной работы.
МОСКОВСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ АВИАЦИОННЫЙ ИНСТИТУТ
(ТЕХНИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ)
Лабораторная работа
Измерение биохимических параметров мочи
с использованием анализатора “УРОЛЮКС”
Содержание
Стр.
1. Введение …………………………………………………………………………………… 4
2. Теоретическая часть ……………………………………………………………………... 5
2. 1. Общие сведения ……………………………………………………………………. 5
2. 2. Принцип работы “Уролюкс” ………………………………………………………… 5
2. 3. Конструкция анализатора “Уролюкс” ………………………………………………. 6
2. 4. Характеристики тест полосок ……………………………………………………….. 8
3. Порядок проведения лабораторной работы …………………………………………….. 9
3. 1. Общие указания ……………………………………………………………………… 9
3. 2. Подготовка к работе ………………………………………………………………..… 9
3. 3. Проведение биохимического анализа ………………………………………………. 10
3. 4. Техническое обслуживание …………………………………………………………. 11
3. 5. Возможные ошибки …………………………………………………………………. 12
3. 6. Выводы и результаты ………………………………………………………………... 12
4. Измеряемые показатели ……………………………………………………………………. 13
|
|
|
5. Контрольные вопросы ……………………………………………………………………. 17
6. Список литературы ………………………………………………………………………… 18
Введение
Исследуя биохимический состав биологических жидкостей человека, таких как кровь и моча, можно судить о работе его жизненно важных органов и течении обменных процессов. Это позволяет выявить или спрогнозировать возникновение болезней. Но в условиях невесомости возникают трудности, связанные со взятием анализа мочи и его обработки. Для этого существует ''сухая химия'', основанная на принципе спектрального анализа.
Исследования с использованием технологии ''сухая химия'' относятся к экспресс-методам. Они могут выполняться не только в клинико-диагностических лабораториях, но и у постели больного, в домашних условиях, на выезде медицинской бригады. По результатам исследований можно судить о работе жизненно важных органов и течений обменных процессов человека. Это позволит лучше защитить человека от вредных факторов космического полета
Теоретическая часть
2. 1. Общие сведения
Невесомость - состояние материального тела, при котором действующие на него внеш-ние силы не вызывают взаимных давлений частиц друг на друга. Вследствие значительного отличия условий невесомости от земных условий, в которых функционирует человеческий организм, проблема невесомости занимает важное место среди других проблем космонавтики. Любые изменения в функционировании важнейших органов человека, нарушения метаболизма различных веществ, изменение динамического равновесия внутренней среды организма (гомеостаза) и другие отклонения в работе организма находят свое отражение в изменении биохимических параметров крови и мочи. Рассмотрим процесс обработки анализа мочи.
|
|
|
Как известно, на Земле действует сила гравитации, благодаря которой у нас не возникает проблем с обработкой анализа мочи. В условиях невесомости нельзя наблюдать мочу в пробирке в том же виде, что и на Земле, поэтому в космосе невозможно применение, так называемой, '' жидкой химии ''.
Для этого существует '' сухая химия '', основанная на принципе спектрального анализа. Приборы, основанные на таком принципе, стали незаменимы при биологических исследова-ниях в космосе. Один из таких приборов - '' УРОЛЮКС ''.
2. 2 Принцип работы ''Уролюкс''
'' Уролюкс '' - малогабаритный анализатор для стандартизованной оценки мочи по 10 различным параметрам при помощи тест-полосок. Прибор, основанный на фотометрической технологии, оснащен 11 оптическими каналами, один из которых предназначен для считывания цвета компенсационного участка полосок. Каждый участок тест-полосок оценивается при помощи света оптимальной длины волны (560, 610 или 650 нм) после стандартного инкуба-ционного периода.
|
|
|
Прибор включает в себя следующие функциональные элементы:
- измерительный блок с источником света;
- детектор;
- аналогово-цифровой преобразователь (АЦП);
- микропроцессор;
- принтер, выполняющий функции информационного табло;
- стабилизированный источник питания.
Процесс измерения начинается после того, как в измерительный блок помещается тест-полоска и кратковременно нажимается кнопка [START]. Система имеет встроенные светоизлучающие диоды, которые излучают свет с длиной волны, специально подобранной к реакциям, происходящим в тест-зонах. Светоизлучающий диод излучает свет определенной длины волны на реакционную зону под оптимальным углом. Свет, падающий на поверхность тестового поля, отражается с различной интенсивностью в зависимости от цвета реакционной зоны и затем определяется детектором, который размещен непосредственно над тестовым полем. Детектор передает электронные сигналы в аналогово-цифровой преобразователь, который присваивает сигналу цифровое значение. Микропроцессор определяет цифровое значение и переводит его, согласно стандарту калибровки, сначала в относительную, а затем в абсолютную величину. Сравнение этой абсолютной величины с сохраняемыми постоянными, специфическими для каждого параметра, величинами позволяет получить искомую концентрацию.
|
|
|
 | |||||||
 | |||||||
| |||||||
| |||||||
Рис. 1 Схема считывания результата с тест-полоски
происходит ошибка, лампочка загорается красным. Расположение индикаторов слева направо таково: ERY (кровь), BIL (билирубин), UBG (уробилиноген), KET (кетоновые тела), GLU (глюкоза), PRO (белок), NIT (нитриты), LEU (лейкоциты), pH (кислотность), SG (удельный вес). В одном ряду с индикаторами, справа от них, располагается зеленая многофункциональная кнопка [START] (5). Ее назначение изменяется в зависимости от того, как долго держать эту кнопку нажатой. О том, какие действия можно выполнять с помощью этой кнопки, рассказывается в
калибровке. Если же параметр имеет критическое значение или же при калибровке прибора описании выполнения лабораторной работы.
Правую половину узкой передней панели занимает черная крышка измерительного блока прибора (6).
На задней панели прибора расположены два гнезда для штекеров. Гнездо с надписью “INTERFACE” предназначено для подключения прибора к компьютеру. Другое гнездо, обозначенное надписью “ 2.3. Конструкция анализатора “Уролюкс”.
Данный прибор выполнен в виде моноблока.
На верхней панели располагается наибольшее количество составляющих частей данного прибора. Слева под серой крышкой (1) находится бумага и картридж для принтера и переключатели единиц измерения исследуемых параметров. На самой крышке есть прорезь (2) для бумаги, на которой распечатываются результаты исследования. На правой части верхней панели прибора расположено10 индикаторов исследуемых параметров (3), которые зажигаются при считывании результата с тест-полоски (4) и при калибровке. Данные индикаторы ориентировочно показывают наличие исследуемых параметров в моче. Если параметр находится в пределах нормы, индикатор зажигается зеленым цветом, то же самое происходит при успешно проходящей X1”, служит для подключения прибора в сеть через адаптер.
 |
Рис. 2. Конструкция анализатора “УРОЛЮКС”.
1 -крышка, открывающая доступ к бумаге и картриджу для принтера и для установки единиц измерения исследуемых параметров;
2 - прорезь для бумаги, выходящей из принтера;
3 - индикаторы исследуемых параметров;
4 - вставленная в прибор тест-полоска;
5 - многофункциональная кнопка [START];
6 - крышка измерительного блока.
2.4. Характеристики тест-полосок.
На жестком носителе из белого пластика при помощи тонкой нейлоновой сетки, образующей ячейки крепится бумага, пропитанная реагентами и абсорбирующий слой, расположенный под ней. Таким образом, чувствительное тестовое поле защищено от контактов, загрязнения и трения. В то же время обеспечивается быстрое и равномерное проникновение мочи в тестовое поле, что необходимо для появления равномерного ее окрашивания. Абсорбирующий слой предотвращает воздействие избытка мочи. Достаточно большие размеры тестового поля позволяют легко считывать результат на белом фоне носителя; различимы даже незначительные изменения окраски. Отпечатанная на пенале для тест-полосок цветовая шкала позволяет визуально оценить результаты теста.
 |
|
Рис. 3. Поперечный срез тест-полоски.
Тест-полоски содержатся в алюминиевом или пластиковом пенале, закрытом крышкой с осушителем, который служит для защиты от влаги. Хранить пенал следует при температуре, не превышающей +300С.
Порядок проведения лабораторной работы.
3.1. Общие указания.
Перед тем, как приступить к лабораторной работе, необходимо ознакомиться с техническим описанием прибора и методикой работы с ним.
Не следует устанавливать прибор вблизи высокочастотных устройств, таких как радиопередатчики, мобильные телефоны, микроволновые устройства и подобные им, так как могут быть получены ошибочные результаты теста.
Измерение биопроб должно проводиться при следующих параметрах внешней среды:
Температура окружающей среды +250С…+320С
Относительная влажность 20%…80%
3.2. Подготовка к работе.
3.2.1. Включить прибор в сеть. “Уролюкс” не имеет кнопки включения/выключения и готов к работе при подаче напряжения питания.
3.2.2. Открыть крышку принтера и вставить печатающий картридж.
3.2.3. Установить рулон бумаги в бумагодержатель, нажать кнопку [START] и держать до тех пор, пока мотор принтера не начнет работать, и не загорятся два крайних левый индикатора ERY и BIL на верхней панели прибора. Ввести кончик бумажного рулона в паз принтера. Нажать кнопку [START]. Когда бумага будет отмотана принтером на 5-7 см, нажать на кнопку [START] вторично, чтобы остановить мотор принтера. Пропустить бумагу через щель крышки блока печати и плотно закрыть крышку.
3.2.4. Установить единицы измерения. Для этого перевести переключатели [UNITS], находящиеся под крышкой блока печати, в положение, соответствующее выбранным единицам измерения. При проведении тестов измеряемые параметры будут распечатываться в этих единицах.
Положение
переключателей
Единицы измерения общепринятые произвольные единицы СИ
единицы (мг/дл) единицы (+,++,+++) (ммоль/л)
Соответствующие установки необходимо произвести и в программном обеспечении для исключения ошибок при передаче данных на персональный компьютер.
3.2.5. Калибровка прибора.
“Уролюкс” необходимо калибровать при первом включении и далее регулярно с интервалом в 7 дней, используя калибровочные полоски “Control Test M”.
- Взять пенал с калибровочными полосками.
- Извлечь одну полоску и немедленно закрыть пенал крышкой во избежание попадания в него пыли.
- Взять контрольную полоску, расположив ее фотометрируемыми областями (имеют форму квадратиков) от себя. Не допустимо дотрагиваться до данных областей полоски, так как любые частицы пыли могут изменить ее коэффициент отражения.
- Открыть крышку измерительного блока.
- Ввести контрольную полоску до упора в паз держателя, находящийся на внутренней поверхности крышки.
- Закрыть крышку измерительного блока и убедиться, что она зафиксирована замком.
- Нажать кнопку [START] и держать до тех пор, пока не начнет работать мотор принтера, после чего немедленно отпустить кнопку. Принтер при этом распечатает сообщение: ”START CALIBRATION” (НАЧАЛО КАЛИБРОВКИ).
- Кратковременно нажать кнопку [START], чтобы начать процесс калибровки. Процесс калибровки сопровождается загоранием соответствующих индикаторов на верхней панели прибора.
- Калибровка прошла успешно, если все индикаторы зажглись зеленым цветом и принтер распечатал сообщение: “CALIBRATION OK” (КАЛИБРОВКА В ПОРЯДКЕ). Теперь прибор готов к измерению биопроб.
- Открыть крышку измерительного блока и удалить контрольную полоску. Ее следует выбросить, так как контрольная пластина может быть использована только один раз.
Если при калибровке загорается один или более красных индикаторов, то распечатывается сообщение “CALIBRATION ERROR” (НЕПРАВИЛЬНАЯ КАЛИБРОВКА). В этом случае следует повторить калибровку, используя новую калибровочную полоску.
Внимание! Не открывайте крышку измерительного блока до окончания процесса калибровки. Калибровочную полоску необходимо доставать из пенала непосредственно перед началом калибровки.
3.3. Проведение биохимического анализа.
“Уролюкс” готов к измерению биопроб только после проведения калибровки. Параметры внешней среды должны находиться в установленных пределах. Измеряемым номерам присваиваются номера, начиная с №1. Если прибор отключить более чем на 1 минуту, нумерация проб опять начнется с №1.
В случае, когда необходимо без выключения прибора измерить новую партию проб (с новой нумерацией), следует по завершении предыдущей серии измерений нажать кнопку [START] и держать до тех пор, пока не начнет работать мотор принтера и не загорится крайний индикатор слева ERY. Кнопку [START] нужно отпустить до того, как загорится второй индикатор слева BIL. Последующие измерения будут распечатываться с №1.
Процедура измерения.
3.3.1. Собрать порцию мочи из середины струи в предназначенную для этого чистую емкость, не прикасаясь ею к телу.
3.3.2. Нанести мочу на тест-полоску, смочив при этом всю поверхность измерительной зоны (10 разноцветных подушечек). Для этого надо тест-полоску опустить на короткое время (максимум – на 1 сек) в емкость с собранной мочой. (Можно не собирать мочу в емкость, а кратковременно подставить тест-полоску под струю мочи.)
3.3.3. Промокнуть тест-полоску сухой белой бумажной салфеткой, не допуская при этом перемещения салфетки относительно тест-полоски.
3.3.4. Открыть крышку измерительного блока и ввести тест-полоску в паз держателя, находящийся на внутренней поверхности крышки.
3.3.5. Закрыть крышку до щелчка. Убедиться, что она зафиксирована замком. Если щелчка не последовало, проверить, введена ли полоска до упора.
3.3.6. Кратковременно нажать кнопку [START]. Прибор распечатает строку с порядковым номером пробы, затем строку “NAME” (ФАМИЛИЯ ОБСЛЕДУЕМОГО) и строки “DATE” (ДАТА ОБСЛЕДОВАНИЯ) и “NOTES” (ПРИМЕЧАНИЯ). Перечисленные строки заполняются при необходимости вручную.
3.3.7. Индикаторы на верхней панели прибора в режиме измерения будут загораться последовательно слева направо, причем последние три – красным цветом.
3.3.8. Распечатка результатов измерений автоматически начинается через 60 секунд после нажатия кнопки [START], начиная с показателя SG (удельный вес) и заканчивая показателем ERY (эритроциты) и сопровождаются загоранием соответствующих индикаторов справа налево. Если измеряемая величина находится в пределах физиологической нормы, то загорается индикатор зеленого цвета. Если измеренное значение превышает норму, загорается красный индикатор, а соответствующая величина при распечатке отмечается звездочкой (*). Индикаторы гаснут через 120 секунд автоматически или ранее, если нажать кнопку [START].
3.3.9.После окончания распечатки данных необходимо открыть крышку измерительного блока и удалить использованную тест-полоску.
Время от нажатия на кнопку [START] до окончания распечатки составляет около 90 сек., что позволяет производить до 40 анализов в час.
Если вместо результатов распечатывается “MEASUREMENT ERROR” (ОШИБКА ИЗМЕРЕНИЯ), или вместо одного из результатов – “ERROR” (ОШИБКА), то имеют место неправильные действия оператора или технический дефект.
3.4. Техническое обслуживание.
“Уролюкс” не требует специального инженерного обслуживания. Прибор следует оберегать от воздействия высоких температур, избыточной влажности и воздействия мощных электромагнитных полей.
В конце рабочего дня необходимо производить чистку измерителльного блока. Для этого следует:
3.4.1. Открыть крышку измерительного блока и вытянуть ее из нижних петель.
3.4.2. Осторожно, чтобы не поцарапать оптику, удалить решетку оптических окон, вытянув ее по рельсам вправо.
3.4.3. Протереть крышку измерительного блока и решетку оптических окон влажной салфеткой, а затем продезинфицировать 70%-ным этанолом (можно использовать чистящую салфетку от прибора “Рефлотрон”). Промокнуть поверхности безворсовой тканью.
3.4.4. Если оптические окна загрязнены мочой, промокнуть их мягкой безворсовой тканью и затем высушить.
3.4.5. Вставить решетку оптических окон по направляющим рельсам на место. Убедиться, что она зафиксирована замком.
3.4.6. Вставить крышку измерительного блока в нижние петли на передней панели прибора и захлопнуть. Убедиться, что крышка зафиксирована замком.
Внешнюю поверхность прибора можно мыть мягкой тканью, смоченной водой с добавлением мягкого моющего средства, избегая попадания влаги внутрь прибора. При этом крышка принтера должна быть закрыта.
3.5. Возможные ошибки.
3.5.1. После включения в сеть или при падении напряжения в сети “Уролюкс” требует калибровки, при этом распечатывается сообщение “START CALIBRATION”.
Причина: при самоконтроле, проводимом после каждого включения или падения напряжения, прибор не обнаружил требуемых результатов калибровки.
Действия: произвести калибровку.
3.5.2. При неправильной калибровке распечатывается сообщение “CALIBRATION ERROR!”.
Причина: калибровочные характеристики отличаются от допустимых.
Действия: повторить калибровку с новой калибровочной полоской, извлеченной из пенала непосредственно перед калибровкой. Произвести чистку оптических окон и их решетки. Убедиться, что решетка, крышка измерительного блока и контрольная пластина находятся в правильном положении.
3.6. Выводы и результаты.
3.6.1. Заполнить таблицу:
| п.п. № учащегося | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | … | n |
| SG (относительная плотность) |
3.6.2. На основе имеющихся данных построить следующий график:
SG
 |
п.п. № учащегося
3.6.3. Определить среднее значение относительной плотности для всей группы.
Измеряемые показатели.
4.1. SG (относительная плотность)
Определение относительной плотности служит для оценки концентрационной функции почек, проверки возможности предполагаемого лизиса клеточных компонентов мочи. Кроме того, определение относительной плотности мочи может дать ценные дополнительные сведения, которые будут полезны при оценке других результатов. Относительная плотность мочи зависит не только от потребления жидкости, но также и от типа заболевания.
Для получения необходимой информации о концентрационной функции почек, нужно провести исследование первой утренней порции мочи; при этом важно, чтобы пациент соблюдал ограничение в потреблении жидкости накануне. Выраженное снижение удельного веса мочи может быть проявлением сниженной концентрационной способности почек, в качестве побочного эффекта лекарственных средств и различных почечных заболеваниях.
При увеличении удельного веса мочи больным необходимо потреблять большие количества жидкости с целью предотвращения формирования камней. У такой группы пациентов определение относительной плотности мочи дает информацию о соблюдении ими питьевого режима.
У здоровых лиц нормальные значения относительной плотности могут варьировать от 1.000 (при избыточном потреблении жидкости) до 1.040 (после продолжительного ограниченичения потребления жидкости).
Принцип теста.
Тест отражает ионную концентрацию мочи. В присутствии катионов происходит высвобождение протонов из комплексообразующих веществ, вследствие чего цвет индикатора бромтимолового синего меняется с синего на желтый.
Тест не позволяет определить содержание недиссоциирующих составляющих мочи, таких как мочевина, креатинин или глюкоза.
4.2. pH (кислотность)
Значение pH мочи зависит не только от особенностей рациона, но и от состояния метаболизма; оно меняется при различных заболеваниях и приеме лекарственных средств.
Если свежая моча имеет стойко щелочную реакцию (pH 7-8) в течение дня, вероятно наличие инфекции мочевыводящих путей. Постоянно кислая моча (pH<7) может быть проявлением предрасположенности к образованию мочекислых камней.
При длительном хранении моча в результате роста бактерий становится щелочной (pH>7). Определение pH при этом теряет какое-либо диагностическое значение.
pH свежей мочи от здоровых лиц может существенно варьировать (pH 4.5-8), но чаще ее значение составляет 5-6.
Принцип теста.
Тестовое поле для определения pH содержит метиловый красный и бромтимоловый синий. Это сочетание обеспечивает различимое изменение окраски от оранжевого через зеленый до синего в диапазоне pH 5-9.
4.3. LEU (лейкоциты).
Лейкоцитурия (повышенная экскреция лейкоцитов с мочой) – кардинальный симптом воспаления почек и/или мочевыводящих путей. Возможны врожденные или приобретенные нарушения оттока мочи, связанные со структурными аномалиями или формированием камней. Особенно большое значение она имеет для диагностики хронического пиелонефрита. Для уточнения диагноза рекомендуется провести бактериальное исследование, т.к. моча, содержащая глюкозу, представляем собой очень хорошую питательную среду для бактерий, что может служить причиной проявления лейкоцитурии.
Хотя понятия нормального и повышенного содержания лейкоцитов в моче четко не разграничены, количество 10-20 лейкоцитов/мкл считается пограничным и должно служить поводом для дальнейшего обследования пациента, а количество лейкоцитов в 1 мкл мочи, превышающее 20, практически всеми специалистами рассматривается как патологическое. Эти показатели приведены, исходя из того, что образцы получены с соблюдением всех требований, предъявляемых к забору мочи.
Принцип теста.
Тестовое поле содержит эфир индоксила, который расщепляется эстеразами гранулоцитов. Высвобождаемый при этом индоксил реагирует с солью диазония, вследствие чего образуется фиолетовое окрашивание и цвет тестового поля меняется с бежевого на фиолетовый.
4.4. NIT (нитриты).
Патогенные бактерии, вызывающие инфекции мочевыводящих путей и присутствующие в моче, восстанавливают нитраты до нитритов.
Распространенность инфекций мочевыводящих путей в популяции варьирует в зависимости от возраста и пола. За исключением периода новорожденности и старческого возраста (более 60 лет), инфекции мочевыводящих путей – это патология женщин. Распространенность инфекций мочевыводящих путей возрастает в старческом возрасте, независимо от пола. Чаще всего, инфекции мочевыводящих путей являются причиной и основным симптомом пиелонефрита.
К группам высокого риска по развитию инфекций мочевыводящих путей и хронического пиелонефрита относятся следующие категории:
- девочки и женщины (особенно беременные);
- лица пожилого и старческого возраста;
- мужчины с аденомой простаты;
- пациенты, страдающие диабетом;
- пациенты с гипертонией;
- пациенты, которым проводилась катетеризация, урологические операции или инструментальные манипуляции;
- и некоторые другие.
Постоянное скрининговое обследование на инфекции мочевыводящих путей особенно женщин и лиц, относящихся к группам высокого риска способствует своевременной диагностике и лечению патологического процесса на ранних этапах, что значительно улучшает прогноз и позволяет предотвратить развитие серьезных последствий.
Для того чтобы результат исследования был точен необходимо соблюдение следующих обязательных условий:
1. Наиболее целесообразно исследование первой утренней порции мочи, т.к. беохимический процесс образования нитритов предусматривает длительную задержку мочи в мочевом пузыре – не менее 4-6 часов.
2. Накануне должна соблюдаться полноценная диета, включающая овощи (шпинат, бобы, кольраби, морковь, капусту и т. д.). Она обеспечивает адекватное количество нитратов в моче. Должны исключиться большие количества консервированных фруктовых соков и другие витамин C-содержащие продукты или препараты.
3. Очень важно исключить использование антибиотиков или химиотерапевтических агентов, т. к. терапия данными препаратами приводит к подавлению метаболизма и роста бактерий, что обуславливает образование недостаточных количеств нитритов.
4. Исследуемый образец мочи должен быть максимально свежим. Длительность хранения на момент тестирования не должна превышать 4 часа, в противном случае повышается вероятность ложноположительных или ложноотрицательных результатов.
Позитивный результат теста на наличие нитритов, при соблюдении всех правил сбора мочи, свидетельствует о наличии инфекции мочевыводящих путей.
Принцип теста.
Ароматические аминосульфаниламиды реагируют с нитритами в кислой среде с образованием соли диазония, которая затем соединяется с 3-гидрокси-1,2,3,4-тетрагидро-7,8-бензохинолином, в результате чего проявляется окрашивание. Интенсивность красного окрашивания отражает концентрацию нитритов в моче, но не говорит о тяжести инфекции.
4.5. PRO (белок).
Согласно результатам эпидемиологических исследований, при определении белка в первой утренней порции мочи предельным уровнем является 0.3 г/л (30 мг/100 мл).
Протеинурия – выделение белка с мочой. По физиологическим причинам повышенное содержание белка в моче у здоровых лиц, отмечаемое чаще всего у лиц моложе 30 лет, составляет до 90% всех протеинурий, встречающихся в этой возрастной группе. Содержание белка в моче может быть вызвано физическими нагрузками (спортом), эмоциональным стрессом, беременностью, перегревом или переохлаждением, применением сосудосуживающих препаратов. Эти протеинурии появляются периодически. Наличие белка в первой утренней порции мочи – нормальное явление, в течение дня уровень белка в моче может достигать 5г/л (500мг/100мл).
Содержание белка в моче может быть вызвано почечными заболеваниями. В этом случае белок обнаруживается как на протяжении дня, так и в ночной моче.
Патологические протеинурии непочечного происхождения, в частности, связанные с коликами, инфарктами, сердечной недостаточностью обычно исчезают после устранения причины.
Принцип теста.
Реагентная бумага в составе тест-полоски содержит буфер и индикатор 3’, 3”, 5’, 5”-тетрахлорфенол-3, 4, 5, 6-тетрабромосульфофталеин, который, при постоянном значении pH, меняет цвет с желтого до зеленого в присутствии белка.
4.6. GLU (глюкоза).
Глюкозурия – повышенное содержание глюкозы в моче. Определение концентрации глюкозы оказывает существенную помощь при выявлении и лечении такого заболевания как диабет. Это заболевание стало в последнее время очень распространенным, главным образом в связи с изменением питания и образа жизни людей. Риск заболевания диабетом увеличивается после 40 лет, т. к. в этом возрасте обостряются сосудистые расстройства. Все эти причины приводят к метаболическим расстройствам, к которым относится и диабет. Также предрасположены к диабету лица, имеющие отягощенную наследственность, матери детей с большим весом при рождении (> 4500 г) или с пороками развития, женщины с выкидышами или мертворождениями в анамнезе. Поэтому необходимо прогнозировать риск возникновения этого заболевания, регулярно измеряя уровень глюкозы в моче. Однако необходимо помнить, что глюкозурия сама по себе не служит поводом для однозначной постановки диагноза, т.к. она может быть связана с другими причинами:
1.Почечная глюкозурия.
Наряду с уровнем глюкозы в крови, на появление или повышенное содержание глюкозы в моче влияет так называемый почечный порог (предел ассимиляции) для глюкозы. Почечный порог для глюкозы крови обычно составляет 9-10 ммоль/л (160-180 мг/100мл). При его значительном снижении содержание глюкозы в моче появляется при нормальном уровне глюкозы в крови.
Глюкозурия беременных чаще всего также имеет почечное происхождение. У 10-15% беременных имеется повышенный уровень глюкозы в моче натощак, а после приема пищи глюкозурия встречается значительно чаще.
2. Алиментарная глюкозурия.
Даже у лиц со стабильным метаболизмом и нормальным почечным порогом может развиваться такой вид глюкозурия вследствие резкого подъема уровня глюкозы в крови, связанного с приемом богатой углеводами пищи.
3. Глюкозурия как следствие поражения почек.
Снижение фильтрационной функции почек до 30% от нормы или более приводит к развитию почечной глюкозурии, которая наблюдается также при острой почечной недостаточности. Концентрация глюкозы всегда превышает 1.7 ммоль/л (30 мг/100мл).
Верхняя граница физиологической глюкозурии для первой утренней порции – примерно 0.8 ммоль/л (15мг/100мл).
Принцип теста.
Детекция глюкозы основывается на специфической глюкозооксидаза-пероксидазной реакции. В результате ферментативного окисления D-глюкозы образуется d-D-глюконолактон. Перекись водорода, образующаяся в ходе этой реакции, в присутствии пероксидазы окисляет индикатор, приводя к появлению окрашивания.
Цепочка ферментативных реакций гарантирует, что глюкоза является единственным составляющим мочи, которое может давать положительный результат.
В ходе реакции отмечается последовательное изменение цвета от желтого (=норма) через светло-зеленый до темно-зеленого.
4.7. KET (кетоновые тела).
Определение кетоновых тел (ацетоуксусной кислоты и ацетона) в моче имеет большое значение для своевременного выявления декомпенсации метаболизма у лиц, страдающих сахарным диабетом. Практически всегда сопровождается кетоацидозом (содержание кетоновых тел в тканях) и кетонурией (содержание кетоновых тел в моче) кома и прекоматозное состояние. При диабетическом кетоацидозе сниженная утилизация глюкозы приводит к гипергликемии (повышенное содержание сахара в крови) и гиперосмолярности () крови. Из-за недостатка инсулина активизируется катаболизм жирных кислот, что приводит к высвобождению больших количеств ацетоуксусной кислоты, часть которой в последующем превращается в b-гидроксимасляную кислоту и ацетон, которые со временем накапливаются. Все эти факторы оказывают повреждающее воздействие на центральную нервную систему и при декомпенсации сахарного диабета ведут к развитию комы.
У пациентов с нераспознанным инсулинзависимым диабетом кетоацидоз может развиваться внезапно. Если больной получает недостаточные дозы инсулина, кетоацидоз прогрессирует постепенно. Это метаболическое расстройство характеризуется кетонурией, ацетоновым запахом изо рта, высоким уровнем глюкозурии.
Чтобы предупредить возникновение таких последствий, необходимо производить тестирование пациентов с сахарным диабетом любого типа на наличие кетоновых тел в моче не реже 1 раза в месяц.
Относительная или абсолютная недостаточность инсулина у взрослых больных с инсулинзависимым диабетом может привести к развитию метаболических расстройств. Однако пациенты, у которых диабет проявился во взрослом возрасте, часто имеющие избыточный вес и получающие оральные антидиабетические препараты, менее предрасположены к развитию кетоацидоза.
Кетонурия выявляется также при голодании, применении специальных диет для снижении массы тела, которые предусматривают потребление пищи с низким содержанием углеводов, но обогащенной белком, или при полном голодании. Этот тип кетоцидоза может быть компенсирован адекватным потреблением жидкостей, не содержащих калорий, и не представляет опасности даже при длительном голодании. В подобных случаях определение кетоновых тел в моче можно использовать для контроля за соблюдением предписанной диеты.
Наличие кетоновых тел в моче может также наблюдаться при неукротимой рвоте беременных, при фебрильной температуре.
Принцип теста.
Для определения в моче кетоновых тел используется следующая реакция: ацетоуксусная кислота и ацетон реагируют с нитропруссидом натрия и глицином в щелочной среде с образованием комплекса, имеющего фиолетовую окраску. Реакция специфична для этих двух кетонов: b-гидроксимасляную кислоту тест выявить не позволяет.
4.8.UBG (уробилиноген).
Уробилиноген образуется из билирубина, отчасти в желчных протоках, но преимущественно в кишечнике, вследствие бактериального восстановления. В физиологических условиях происходит полная ресорбция уробилиногена, затем это вещество по портальной вене поступает в печень, где происходит его разрушение.
Верхняя физиологическая граница содержания уробилиногена в моче – 17 мкмоль/л (1 мг/100 мл). В основе повышенного выделения уробилиногена с мочой может лежать повышенный распад гемоглобина или дисфункция печени. К дисфункциям печени в данном случае относится снижение способности печени участвовать в циркуляции желчных пигментов, либо выпадение печени из этого процесса. Повышенный распад гемоглобина может иметь место при различного рода анемиях, при рассасывании массивных гематом, при внутрисосудистом гемолизе и т.д..
Уробилиноген отсутствует в моче при прекращении выработки печенью желчи, при наличии препятствия оттоку желчи, при прекращении восстановления билирубина в кишечнике (при отсутствии кишечной флоры).
Принцип теста.
Определение уробилиногена основано на реакции, которая является принципиально новой: стабильная соль диазония (4-метоксибензенедиазония фторборат) немедленно реагирует с уробилиногеном в кислой среде, в результате чего образуется красное окрашивание. Интенсивность этого окрашивания соответствует концентрации уробилиногена.
4.9.BIL (билирубин).
Билирубин – продукт распада гемоглобина – образуется в селезенке и печени. Свободный билирубин растворим в жире, но не растворим в воде. Соединение с глюкуроновой кислотой превращает билирубин в водорастворимый, который может выделяться с мочой.
Желтуха проявляется при уровне сывороточного билирубина > 34 мкмоль/л (2 мг/100мл). Билирубин связывается эластическими волокнами кожи и поверхности глаза, обуславливая появление желтой пигментации.
В моче здоровых лиц билирубин не определяется. С мочой выделяется только водорастворимый билирубин. Наличие билирубина в моче отмечается при различных видах желтух, острых и хронических гепатитах, циррозах и т.д..
Принцип теста.
Определение билирубина основано на реакции билирубина со стабильной солью диазония (2, 6-дихлоробензенедиазония фторборат) в кислой среде, в результате чего образуется фиолетовое окрашивание, интенсивность которого соответствует концентрации билирубина.
4.10.ERY(кровь).
Гематурия (выделение эритроцитов с мочой) – симптом, который может возникать при многих заболеваниях. Поэтому определение ее причины имеет исключительно важное значение. Это относится как к микрогематурии, так и к макрогематурии, когда наличие крови проявляется визуально красным окрашиванием мочи; это происходит при содержании не менее 0.5 мл крови в 1 л мочи (т.е. примерно 2500 эритроцитов/мкл). Микрогематурия не влияет на цвет мочи.
Основные причины гематурии – патология почек, урогенитального тракта и геморрагические диатезы. Также она обнаруживается при инфекциях мочевыводящих путей, правосердечной недостаточности, диабете, травмах почек и мочевыводящих путей и некоторых других заболеваниях.
Нормой считается обнаружение до 3 эритроцитов в 1 мкл мочи.
Принцип теста.
Тест основан на том принципе, согласно которому гемоглобин и миоглобин катализируют окисление цветового индикатора органическим гидропероксидом (2,5-диметил-2,5-дигидропероксигексан) с образованием сине-зеленой окраски, которая выглядит зеленой на желтом фоне тест-бумаги.
На реагентной бумаге происходит гемолиз интактных эритроцитов; высвобождающийся при этом гемоглобин “запускает” цветовую реакцию, в ходе которой каждый эритроцит вызывает появление видимой зеленой точки. Так как тест-бумага впитывает несколько микролитров мочи, количество зеленых точек, которые появляются на тестовом поле, будет превышать количество, указанное для соответствующего цвета эталонной шкалы, который относится к 1 мкл мочи.
Для оценки содержания эритроцитов и гемоглобина используются различные цветовые шкалы.
Контрольные вопросы
Для чего предназначен прибор "Уролюкс", и какие параметры он измеряет ?
Какую диету необходимо соблюдать, чтобы результаты анализа были наиболее точными ?
Как происходит считывание результата анализа в приборе?
Назовите составные части прибора “Уролюкс”.
Список литературы.
Строгонова Л.Б.
Конспект лекций по курсу “ Медико –биологическое обеспечение полетов “
Краткое руководство по анализу мочи. Издательство “Roche”.
Дата добавления: 2020-11-29; просмотров: 165; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!