Санитарно-бактериологическое исследование воздуха
Микробиологическое исследование атмосферного воздуха, а также воздуха жилых помещений, занимает важное место при осуществлении его очистки от бактериального загрязнения, как мера борьбы с аэрогенными инфекциями.
Объектами санитарно-бактериологического исследования являются: воздух лечебно-профилактических и детских учреждений, мест массового скопления людей, промышленных районов (табл. 4). Для оценки работы вентиляции проводят исследование воздуха на различных этажах жилых зданий.
Исследование воздуха включает определение общего числа сапрофитных бактерий, стафилококков, стрептококков, которые являются показателями биологической контаминации воздуха микрофлорой носоглотки человека. При исследование воздуха родильных домов, хирургических клиник определяют УПМ, вызывающие внутрибольничные инфекции.
Методы отбора проб воздуха можно разделить на седиментационные и аспирационные.
Седиментационный метод. Основан на оседании бактериальных частиц и капель под влиянием силы тяжести на поверхности агара открытых чашек Петри. Их устанавливают в точках отбора на горизонтальной поверхности. Для определения общей микробной обсемененности воздуха чашки Петри с МПА оставляют открытыми на 5-10-15 мин в зависимости от предполагаемого бактериального загрязнения. Для выявления санитарно-показательных микроорганизмов экспозиция чашек с элективными средами увеличивается до 30-60 мин. Инкубацию посевов проводят при 370 24 ч, затем чашки Петри оставляют при комнатной температуре на 48 ч для образования пигмента пигментообразующими бактериями.
|
|
|
Для определения микробного числа подсчитывают колонии выросшие на чашках Петри (площадь поверхности агара в чашке равна 75 см2) и расчет ведут по правилу В.Л. Омелянского: на поверхность площадью 100 см2 за 5 мин оседает такое количество микробов, которое содержится в 10 л воздуха.
А х 100 х 100
Х = , где
75 см2
Х - количество микробов в 1 м3;
А - количество колоний на агаре в чашке Петри.
Аспирационный метод. Основан на принудительном оседании микроорганизмов на поверхность плотной питательной среды или в улавливающую жидкость. Для этой цели используются аппарат Кротова, бактериоуловитель Речменского, прибор ПОВ-1 и др.
Для определения общего числа бактерий забирают две пробы по 100 л каждая. Посевы инкубируют в термостате 24 ч, а затем оставляют на 48 ч при комнатной температуре. Подсчитывают количество колоний на чашках, вычисляют среднее арифметическое и делают перерасчет на количество микроорганизмов в 1 м3 воздуха.
Определение стафилококков
Обнаружение патогенных стафилококков в воздухе закрытых помещений имеет санитарно-показательное значение и свидетельствует об эпидемическом неблагополучии (табл. 5). Отбор проб проводят с помощью аппарата Кротова в количестве 250 л воздуха на 2 чашки Петри с молочно-солевым агаром и на чашку с кровяным агаром. Посевы инкубируют при 370С 48 ч. Из подозрительных на стафилококк колоний выделяют чистую культуру на скошенном агаре. После 24 ч инкубации при 370проверяют плазмокоагулирующую активность культуры.
|
|
|
При необходимости установления источника возникновения стафилококковой инфекции и путей ее распространения проводят фаготипирование культуры.Подсчитывают количество выросших колоний стафилококка в 1 м3 воздуха.
Критерии оценки воздуха жилых помещений
| Оценка воздуха | Общее количество бактерий в 1 м3 | Количество стрептококков |
| Лето чистый загрязненный | до 1500 до 2500 | до 16 до 36 |
| Зима чистый загрязненный | до 4500 до 7000 | до 36 до 124 |
Определение стрептококков
Отбор проб воздуха при исследовании на наличие a- и b-гемолитических стрептококков проводят аппаратом Кротова на чашках Петри с кровяным агаром. Исследуют 250 л воздуха. Посевы выдерживают в термостате 24 ч, а затем еще 48 ч при комнатной температуре. Подсчет количества выросших колоний проводят на 1 м3 с последующим контрольным микроскопированием и выборочным пересевом колоний на кровяной агар или сахарный бульон.
|
|
|
БИЛЕТ № 79
Неспецифические факторы защиты врожденные и лишены избирательности, так как действуют на любой микроорганизм.
К первичным барьерам неспецифических факторов защиты относятся:
1. Кожа — покрывает все тело и механически защищает организм от проникновения микробов, вирусов и т.д. На коже также имеются потовые и сальные железы, которые вырабатывают молочную и жирные кислоты. Известно, что кислая среда губительно действует на микроорганизмы. Если на поверхность чистой кожи нанести микробы, то через 30 мин они погибнут. Грязная кожа обладает сниженными бактерицидными свойствами, поэтому мытье рук и тела является важным условием сохранения защитной роли кожи.
2. Слизистые оболочки носоглотки, дыхательных путей, кишечника обладают еще более выраженными защитными свойствами, чем кожа. В слезах, слюне обнаружен лизоцим, который растворяет многие сапрофитные микробы, а также некоторые патогенные. Известно, что в слюне у собак лизоцима содержится в 100 раз больше, чем у человека. Поэтому слюна собак является более бактерицидной. Эпителий слизистых путей также механически препятствует проникновению микроорганизмов, эту роль выполняет слизь и реснитчатый эпителий, освобождающие слизистые оболочки от попавших на них частичек. В желудочно-кишечном тракте защитную роль выполняют соляная кислота желудочного сока, которая убивает микроорганизмы. Еще в древние времена люди знали об этом свойстве, поэтому врач никогда не приходил к больному на «голодный» желудок.
|
|
|
3. Нормальная микрофлора организма человека обладает антагонистическим действием к различным видам микроорганизмов. Она препятствует их размножению и проникновению в организм. Например, кишечная палочка вырабатывает молочную кислоту, которая оказывает губительное действие на бактерии. Если микроорганизмы преодолевают эти барьеры, то в работу вступают вторичные барьеры неспецифических факторов защиты. К ним относятся:
1) гуморальные факторы — система комплемента. Комплемент — это комплекс 26 белков в сыворотке крови. Обозначается каждый белок, как фракция, латинскими буквами: С4, С2, СЗ и т. д. В условиях нормы система комплемента находится в неактивном состоянии. При попадании антигенов он активируется, стимулирующим фактором является комплекс антиген — антитело. С активации комплемента начинается любое инфекционное воспаление. Комплекс белков комплемента встраивается в клеточную мембрану микроба, что приводит к лизису клетки. Также комле-мент участвует в анафилаксии и фагоцитозе, так как обладает хемотаксической активностью. Таким образом, комплемент является компонентом многих им-мунолитических реакций, направленных на освобождение организма от микробов и других чужеродных агентов;
2) клеточные факторы защиты.
Фагоциты. Фагоцитоз (от греч. phagos — пожираю, cytos — клетка) впервые открыл И. И. Мечников, за это открытие в 1908 г. он получил Нобелевскую премию. Механизм фагоцитоза состоит в поглощении, переваривании, инактивации инородных для организма веществ специальными клетками-фагоцитами. К фагоцитам Мечников отнес макрофаги и микрофаги. В настоящее время все фагоциты объединены в единую фагоцитирующую систему. В нее включены: промоноциты — вырабатывает костный мозг; макрофаги — разбросаны по всему организму: в печени они называются «купферовские клетки», в легких — «альвеолярные макрофаги», в костной ткани — «остеобласты» и т. д. Функции клеток-фагоцитов самые разнообразные: они удаляют из организма отмирающие клетки, поглощают и инактивируют микробы, вирусы, грибы; синтезируют биологически активные вещества (лизоцим, комплемент, интерферон); участвуют в регуляции иммунной системы.
Процесс фагоцитоза, т. е. поглощение инородного вещества клетками-фагоцитами, протекает в 4 стадии:
1) активация фагоцита и его приближение к объекту (хемотаксис);
2) стадия адгезии — прилипание фагоцита к объекту;
3) поглощение объекта с образованием фагосомы;
4) образование фаголизосомы и переваривание объекта с помощью ферментов.
Фагоциты — подвижные клетки и могут перемещаться по направлению к объекту. Движение фагоцита к объекту называется хемотаксисом. Как правило, фагоциты «переваривают» захваченные чужеродные агенты, тогда говорят о завершенном фагоцитозе. Но не всегда фагоцитоз заканчивается перевариванием — такой фагоцитоз называется незавершенным. Причины, обусловливающие незавершенный фагоцитоз:
1) некоторые микроорганизмы подавляют слияние фага и лизосомы;
2) некоторые микроорганизмы выделяют вещества, которые нейтрализуют действие рибосомальных ферментов;
3) некоторые микроорганизмы могут выходить из фагосо-мы;
4) некоторые бактерии имеют устойчивость к лизосомаль-ным ферментам (гонококк, стафилококк, палочки туберкулеза и лепры).
В организме есть вещества — обсанины, которые повышают фагоцитоз. Это нормальные антитела, которые «обволакивают» антигены и способствуют их фиксации на фагоците.
БИЛЕТ № 19
Листериоз- инфекционная болезнь с/х животных многих видов, грызунов, птиц и человека. Характеризуется поражением ЦНС, репродуктивных органов (аборты), молочной железы (маститы), признаками септицемии. Протекает остро и хронически.
Возбудитель – Listeria monocytogenes, род Listeria.
Лаборатоная диагностика основана на результатах бактериологического и серологического исследования.
Бак исследование включает в себя обнаружение возбудителя в исходном материале методами световой и люминесцентной микроскопии, биопробы, выделение чистой культуры посевом на питательные среды и идентификацию возбудителя по всем признакам
Материал для исследования. В лабораторию направляют трупы мелких животных или органы (головной мозг, печень,селезенку, почки, пораженные легкие, абортплод с оболочками, истечения из половых органов, секрет пораженной доли вымени, кровь или сыворотку крови.
Морфология. Мелкие бактерии с закругленными концами, Гр+, без спор, размером 5,0-2 мкм. При 20-220 С образуют жгутики, подвижны.На сывороточных средах формируют капсулу. Располагаются одиночно, парами, напоминающими римскую цифру 5, или в виде частокола. Из материала готовят мазки, окрашивают по Граму и флуоресцирующими сыворотками. Листерии из материала в виде Гр+ нередко полиморфных палочек.
Культуральные свойства. Факультативные анаэробы, оптимально 36-380 С, диапазон 4-450 С, способны расти на средах с повышенным содержанием хлорида натрия.
Посевы делают в МПБ, или МППБ, на агар с добавлением глюкозы 1% и глицерина 2-3%, на МПКрА.
При исследовании загрязненного материала используют селективные среды: МПА с теллуритом калия и полимиксином, среды с 10% хлорида натрия.
Для увеличения концентрации возбудителя часть материала оставляют при 40 С до 30 суток. При необходимости делают пересевы с интервалом 10 сут. Посевы инкубируют до 2 нед.
На МПА – прозрачные, мелкие, круглые , росинчатые колонии с ровными краями. В косопроходящем свете- голубоватог цвета с зеленоватым оттенком и мелкозернистой структурой. На МПКрА – вокруг колоний образуется зона β-гемолиза. В МПБ- слабое помутнение среды, через 5-7 дней на дне пробирки слизистый осадок. В МПЖ при посеве уколом по центру наблюдается рост в виде шнура. Для определения подвижности засевают уколом в полужидкий агар(0,2%), инкубируют при 20-220 С. Сначала рост по уколу, затем по всему столбику питательной среды (подвижен).
Биохимические свойства. Разлагают с образованием кислоты без газа в средах Гисса глюкозу, салицин, мальтозу, рамнозу, трегалозу; не образует сероводород, выделяет каталазу. Обесцвечивают при росте в МПБ ряд красителей ( среды с метиленовым синим, метиротом, конгоротом, нейтрльротом, амидо черным). Посевы смотрят через 3,6,24,48 ч.
Серологическая диагностика. Для видовой идентификации ставят реакцию с поливалентной агглютинирующей сывороткой, контроль с физраствором. На втором этапе определят серотип при помощи сывороток.
Серологически ставят пробирочную РА и РСК. Для КРС и лошадей - 1:400 (1:200 сомнительная), для овец, коз, свиней – 1:200 (1:100), для кроликов – 1:50(1:25). В РСК исследуют сыворотки крови, разведенные 1:10.
Биопроба. Тканевой суспензией подкожно или внутрибрюшинно заражают 2-3 белых мышей по 0,3-0,5мл. Гибель через 2-6 сут, , особенно 5-6 дневные мышата – 18-36 час.Павших подвергают бакисследованию.Для дифференциации от рожи ставят конъюктивальную пробу. На конъюктиву глаза морской свинки наносят 2 капли бульонной культуры. Вирулентные листерии на 2-4 сут вызывают гнойны кератоконъюктивит.
Биопрепараты.
1Вакцина живая сухая против листериоза из штамма «АУФ».
2Вакцина из двух серотипов листерий.
3Листериозные диагностические агглютинирующие сыворотки.
4 Листериозные флуоресцирующие сыворотки.
Дата добавления: 2019-11-25; просмотров: 170; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!