МОРФОЛОГИЧЕСКОЕ И СТРУКТУРНОЕ РАЗНООБРАЗИЕ БАКТЕРИЙ
Занятие 1. Морфологическое разнообразие бактерий
|
 |
Морфологические типы бактерий по сравнению с высшими организмами немногочисленны. Клетки значительной части бактерий имеют сферическую, цилиндрическую или извитую формы (рис. 1).
Рис.1. Морфология бактерий. Кокковые формы:
1 - диплококки, 2 - стрептококки,3 - тетракокки, 4 - сарцины, 5 - стафиллококки; цилиндрические формы: 6 - одиночные палочки и цепочки клеток; извитые формы: 7 - вибрионы, 8 - спириллы, 9 – спирохеты
Сферические формы бактерий - кокки после деления могут существовать в виде отдельных клеток или образовывать сочетания клеток различной формы. Кокки, делящиеся в одной плоскости и в одном направлении, могут образовывать пары - диплококки или цепочки клеток - стрептококки.
Когда деление происходит равномерно в двух перпендикулярных плоскостях, возникают группы из четырех клеток – тетракокки, а если в трех, то образуются пакеты правильной формы – сарцины. При неравномерном делении в нескольких плоскостях наблюдаются скопления неправильной формы, напоминающие гроздь винограда, – стафилококки.
Цилиндрические формы бактерий имеют вид палочек с прямыми, округлыми или заостренными концами. Они нередко образуют пары или цепочки клеток. Для ряда палочек, относящихся к разным видам, характерен выраженный полиморфизм. Изменение формы, связанной с развитием бактерий, наблюдается у азотобактера и
|
|
|
-15-
клубеньковых бактерий. В молодой культуре азотобактера можно обнаружить клетки не только палочковидной, но и овальной форм.
Извитые формы бактерий бывают трех типов: вибрионы, спириллы и спирохеты. Вибрионы выглядят как слегка изогнутые палочки. Спириллы имеют два или более крупных завитков, а спирохеты – клетки, с многочисленными мелкими завитками, длина которых во много раз превышает их диаметр.
Приготовление препаратов
Микроскопические исследования бактерий можно осуществлять, рассматривая их как в живом состоянии без окрашивания или в прижизненно окрашенных временных препаратах, так и в специально приготовленных постоянных препаратах, в которых клетки бактерий убиты. Постоянными, или фиксированными, называются такие препараты, в которых микроорганизмы зафиксированы, т.е. прикреплены к предметному стеклу, а после окрашены. Фиксация имеет целью убить бактериальные клетки, возможно полнее сохранив при этом их прижизненную структуру. Известно много способов фиксации препаратов. Наиболее распространена фиксация жаром (фламбирование). Этим способом хорошо фиксируется форма бактериальной клетки и хуже ее размеры, так как происходит частичное сморщивание клеток, нарушается также структура внутриклеточных органелл. Поэтому для изучения внутреннего строения клеток бактериальные препараты фиксируют химическими веществами: 95%-ным этиловым спиртом или смесью равных объёмов этилового спирта и эфира.
|
|
|
Для окрашивания используют спиртовые или водные растворы анилиновых красителей. Наиболее удобными из них являются красные краски - фуксин основной, сафранин (2 мин) и синие краски - метиленовый синий (5 мин), генцианвиолет (2 мин).
Методы окраски могут быть простыми, когда препарат обрабатывается одним красителем, и сложными, если для окраски используются два и более красителей. Приготовление фиксированного препарата «мазок». Чистое обезжиренное предметное стекло достают из банки с окрашенным спиртом и проносят через пламя горелки. После сгорания спирта подсушенное стекло кладут на подставку и пипеткой в центр его наносят небольшую каплю воды.
В правую руку берут металлическую петлю и прокаливают её
-16-
в пламени горелки. Затем охлажденной петлей отбирают небольшое количество бактериальной культуры и вносят её в каплю воды, которая в дальнейшем распределяется по поверхности стекла тонким слоем. Петля затем прокаливается в пламени горелки, а предметное стекло с нанесённым мазком выдерживается при комнатной температуре до полного высыхания препарата.
|
|
|
Высушенный препарат фиксируют, проводя стекло - мазком вверх - 3-4 раза через пламя горелки, пока не появляется ощущение жжения при прикладывании стекла к тыльной стороне руки. Спиртовку после фиксации мазка следует затушить, накрыв колпачком.
Фиксированный препарат помещают на подставку над чашкой, пипеткой мазок заливают раствором фуксина и выдерживают 2 мин. После окрашивания препарат промывают водой из колбы, держа стекло над чашкой, а затем предметное стекло снизу и сверху (не касаясь препарата) протирают фильтровальной бумагой для удаления воды. Препарат выдерживают на воздухе до полного высыхания.
Микроскопирование препарата. Предметное стекло с приготовленным препаратам помещают на предметный столик микроскопа таким образом, чтобы пучок света проходил через окрашенную зону, в которой находится мазок. На эту зону наносят каплю иммерсионного масла, в которую с помощью макрометрического винтa, опуская тубус микроскопа, вводят объектив, имеющий черную риску (иммерсионный объектив). Эту операцию следует проводить очень осторожно, поскольку фронтальная линза иммерсионного объектива довольно слабо держится в оправе и при грубом обращении может сместиться. После погружения объектива в масло осторожно, также пользуясь макровинтом, поднимают тубус и, наблюдая в окуляр микроскопа, находят окрашенную плоскость препарата и проводят точную фокусировку объекта. Меняя поле зрения путем медленного перемещения предметного стекла, просмотреть препарат и найти наиболее хорошую зону с окрашенным объектом.
|
|
|
По окончании микроскопирования и после просмотра препарата преподавателем поднимают с помощью макровинта тубус микроскопа и осторожно протирают фронтальную линзу объектива мягкой салфеткой, смоченной бензином. Протирать объектив от иммерсионного масла другими растворителями, например ксилолом или ацетоном, не рекомендуется, так как он может растворить состав, склеивающий линзы объектива. Предметные стекла с отработанными препаратами складывают в банку с дезинфицирующим раствором.
-17-
Объекты исследования:Sarcina flava, Bacillus subtilis, Rhodospirillum rubrum.
Задания
1. Приготовить препарат "мазок" из предложенных преподавателем чистых культур бактерий.
2. Просмотреть приготовленные препараты под микроскопом с иммерсионным объективом, показать преподавателю и зарисовать формы бактерий в рабочей тетради.
Контрольные вопросы Морфология бактерий. Приготовление препарата "мазок". Правила микроскопирования препаратов.
Дата добавления: 2019-09-02; просмотров: 260; Мы поможем в написании вашей работы! |
Мы поможем в написании ваших работ!