СКОРОПОСТИЖНАЯ СМЕРТЬ ОТ ЕСТЕСТВЕННОЙ ПРИЧИНЫ. 9 страница

⇐ ПредыдущаяСтр 39 из 112Следующая ⇒

Изменения гемоглобина обнаруживаются на цвете кровяного пятна. Красный цвет, особенно резко заметный на светлом фоне, становится вскоре буро-красным, затем все более и более бурым, серовато-бурым и наконец совершенно серым. Как показывает опыт, эти изменения наступают гораздо быстрее под влиянием прямого солнечного света.

Если смочить в крови кусочек холста и выставить его на солнце, то сторона пятня, обращенная к солнцу, становится через короткое время серой, тогда как на противоположной стороне неизмененная окраска сохраняется еще довольно долгое время.

При определении давности кровяного пятна наряду с цветом его и сте-

¹ Указанные свойства не доказательны для менструальной крови. Так, бедность фибрином — понятие довольно относительное и трудно приложимое в конкретном случае. Присутствие гликогена доказывает лишь, что клеточные элементы и кровотечение происходят из половых органов без указания на этиологию последнего. Доказательством менструальной крови служило присутствие характерных элементов слизистой оболочки литки в менструальном периоде, т. е. децидуаподобных клеток и штопорообразноизвитых желез слизистой оболочки матки. Но эти находки чрезвычайно редки в судебно-медицинской практике, когда приходится иметь дело почти исключительно с кровяными пятнами. Ред.

350

henbio растворимости следует принять во внимание моменты, под влиянием • которых подобные изменения ускоряются или замедляются. Конечно определение давности пятна может быть только приблизительным.

Для открытия красящего вещества крови в подозрительном пятне воспроизводят абсорбционный спектр гемоглобина или его производных. Из подозрительного на кровь пятна приготовляют раствор, который исследуется с помощью спектроскопа. О этой целью пользуются карманным спектроскопом Браунинга, а при небольших объектах — микроспектроскопом, который вставляется вместо окуляра в любой микроскоп. В настоящее время применение его в судебно-медицинской практике очень распространено. Для спектрального анализа раствор вытяжки из подозрительного на кровь пятна наливают в мелкие узкие пробирки или стеклянные коробочки с плоскопараллельными стенками, предложенными Цкмке диам. в 1 см и длиною в 4 см. Они

особенно пригодны для исследова- ^сb e f

ния очень слабых растворов.

Рис.126. Вверху—спектр окиси гемоглобин; ьнизу—спектр восстановленного гемоглобина.

Для научного исследования полос поглощения гемоглобина и его производных, лежащих в фиолетовой части спектра , пользуются ультраспектроскопом с сильным источником света (солнечный свет, вольтова дуга). Мирто (Mirto) и в особенности Цимке рекомендуют пользоваться полосами поглощения в фиолетовой части спектра. Для открытия их в очень разведенных растворах они применяют, решетчатый спектроскоп Шумма (Schurnm), в котором свет проходит через узкую решетку, разлагаясь на одинаковой величины спектральные полосы. Спектрофотография не завоевала себе пряв гражданства в судебно-медицинской практике. Кроме Мирто ею занимался главным образом Цимке.

Если развести кровь большим количеством воды и поместить раствор между щелью спектроскопа и источником света, то фиолетовый конец нормального спектра бывает затемнен, а в желто-зеленой части спектра лежат две полосы поглощения. Первая из них, более узкая и темная, находится в желтой части спектра вблизи фрауэнгоферовой линии D; другая же, почти вдвое шире, но светлее первой, лежит в зеленой части спектра вблизи фрауэнгоферовой линии (рис. 126). Это—спектр оксигемоглобина.

Эти явления поглощения заметны уже на весьма слабых растворах. Опытный глаз может еще различить абсорбционные полосы тогда, когда простому глазу раствор представляется едва окрашенным. При дальнейшем разведении раствора сначала исчезает полоса в зеленом поле и наконец полоса у линии D.

Если отнять у раствора кислород путем прибавления восстанавливающих веществ, для чего обыкновенно пользуются сернистым аммонием, гидросульфитом натрия или гидрацин-гидратом ¹, то спектр изменяется: он становится темнее, с красноватым оттенком, обе же полосы оксй гемоглобина исчезают. Остается только одна широкая полоса поглощения, нерезко

¹ Куртиус (Curtius, jouni. f. prakt. Chemie, II, 39, 27) рекомендовал в качестве восстанавливающего средства гидроцин в виде сульфата; Г ю фн e p (Hufner, Arch. f. Anat. u. Physiol., 1894, Phys. abt., стр. 156) — гидрат гидраиина (имеется в продаже в виде 50% раствора); Ц е и н е к (Zeynek, Ztschr. f. Physiol. Chem., m. XXV, кн. 5 и 6) применял по предложению Гюфнера гидрат гидрацина в качестве восстанавли вающего средства для получения гемохромогена. Бенткер (Bentker) изучал дей ствие различных восстанавливающих веществ на соединения гемоглобина (Vierteljahrss. f. ger. Med., 1908, т. 35, стр. 262); то же сделал D а l l a V o 11 а.

351

•ограниченная, занимающая большую часть пространства между линиями
D и Е. Это спектр лишенного кислорода, восстановленного
гемоглобина (рис. 126), который тотчас же переходит в спектр окси-
гемоглобина, если встряхивать раствор с воздухом. ч*с

Спектральные свойства гемоглобина в высокой степени характерны и сами г-о себе совершенно достаточны для того, чтобы полученное из подозрительного пятна красящее вещество, обладающее этими свойствами, признать за гемоглобин. Другие красящие вещества или не дают никаких полос поглощения, или же существенно отличающиеся от кровяных.

Только аммиачный раствор кармина при сильном разведении даст явления поглощения, напоминающие оксл гемоглобин, однако от прибавления сернистого аммония полосы не изменяются, кроме того они остаются и при обработке уксусной кислотой.

Спектральный анализ не представляет трудностей. Если при мацерации пятна раствор получается мугный, как это часто бывает при старых пятнах, то рекомендуется его отфильтровать. Если приходится исследовать небольшие пятна, отдающие мало красящего вещества, то раствор вливают в соответственно мелкие сосуды (тонкий трубочки). Вообще при обработке малых объектов необходимо соразмерять количество раствора с количеством исследуемого вещества. Слишком разведенные растворы сгущаются в эксикаторе. После совершенного высыхания раствора в часовом стекле остаток .или непосредственно или после увлажнения водою можно поместить перед щелью спектроскопа. При весьма малых количествах красящего вещества уместно применение микроспектроскопа, посредством которого характерные полосы поглощения открываются при минимальных количествах крови.

Из производных гемоглобина следует упомянуть о м е т г е м о г л о-€ и н е, обладающем известными спектральными свойствами, с которыми приходится часто встречаться при исследовании невполне свежих кровяных идов. Если слишком старое кровяное пятно имеет уже заметно буро-асный цвет, и полученный из него водный раствор бурого оттенка, то при хтральном анализе можно обнаружить кроме полос оксигемоглобина еще гью узкую полосу в красном цвете, между фрауэнгоферовыми линиями с и D (рис. 127). Полоса поглощения в красном цвете характерна для меггемоглобпна¹, отличающегося от гематина главным образом своей растворимостью в воде. Если к мушому раствору прибавить каплю аммиака, го раствор проясняется и сделается красным, а полоса в красном цвете исчезает, так как образуется щелочной метгемоглобин.

Другое производное гемоглобина, обладающее весьма характерны/аи слектрильными свойствами и потому очень пригодное для открытия крови в « цозрительных следах, нерастворимых более в воде, есть гемохромо-ген² (восстановленный гематин), получаемый из щелочного гематина под влиянием восстанавливающих веществ. Вишнево-красного цвета гемохромоген имеет 2 полосы поглощения между линиями D и Е. Характерной из них является темная полоса, лежащая между полосами оксигемоглобина; ее легко распознать потому, что впереди ее, по направлению к красному цвету, видна еще зеленая часть спектра. Эта полоса имеет тем

¹ В. Z е у n е k, Arch. f. Anatomie u. Physiologie, physyol. Abt. 1899.

³ Литература о гемохромогене о собствен, «красящем комплекте гемоглобина>> см. H о p p e-S е у 1 е г, Arch, f, path. Anat. u. Physio!., 1862, т. 23, стр. 446, Z е у _n e k, «her das Haemochrornogen, Ztstfhr. f. physiol. Chemie, •». 25 и Wien. kl. Woch, 1899, № 51.

352

ный цвет и хорошо различима в сильно разведенных растворах, когда вторая полоса, лежащая вблизи линии Е, уже не заметна (рис. 127). В очень разведенных растворах различима только лежащая у линии D более темная полоса гемохромогена. Для получения спектра гемохромогена рекомендуется растворить исследуемое вещество в спиртовом растворе едкого кали. При нагревании почти тотчас образуется щелочной раствор гематина, к которому прибавляют в качестве восстанавливающего средства одну каплю, по возможности концентрированного раствора гидрацин-гидрата. Даже в том случае, когда объзкт настолько мал, что вытяжка из него совершенно бесцветна и остается прозрачной, как вода, после восстановления получается не только характерный для гемохромогена спектр, но и вишнево-красный цвет раствора, исчезающий при встряхивании с воздухом и вновь появляющийся с прибавлением восстанавливающего вещества или при его избытке.

Гофман пользовался концентрированным раствором цианистого калия'.
Полученный таким образом тёмнокрасного цвета раствор (циан-гематина) дает при соот-
ветствуюглем разведении ясную широкую полосу в зеленом ноле, напоминающую полосу
восстановленного гемоглобина, или же ,

только затемнение этой части спектра. » О E о г

С прибавлением одной или нескольких капель сернистого аммо'ния (циан-гемо-хромоген) получается две полосы поглощения, которые не совсем сходны с полосами гемохромогена и отличаются главны« образом тем, что ode они одинаково интенсивны².

Цимке также одобряет приме
няемый в течение двух десятков лет в
Вене способ Гофмана, так как циа
нистый калий является превосходным
растворителем крови, и спектр получа- р_ис. 127. Вверху спектры не трального мет
ется даже в очень разведенных раст- гемоглобина; в середине—спектр щелочного
ворах. гематина; внизу—спектр гемохромогена.

Спектр гемохромогена можно

получить при обработке концентрированным раствором едкого кали (33%) без прибавления восстановляющих средств, в особенности при подогревании. Ролле (Rollet)³ построил на этом свой способ, по которому на одном и том же препарате можно констатировать кровяные тельца и красящее вещество крови с помощью микроспектроскопа.

В Венском судебно-медицинском институте с давних пор исследова-

¹См. ст. E. v. Hofmann; Zur kenntnis der Befunde nach Ziankalium Vergiftung.
W. med. Wochenschr., 1876, №№ 45 и 46. В качестве невидимому нового средства для от
крытая кровяных пятен Кацснав (Gazenave) предложил подбный же способ обработки
посредство v; аммиака. •

²При употреблении концентрированного раствора химически чистого цианистою
калия вообще не получается раствора гематина, т только тогда, когда употребляется
не совсем чистое химическое вещество. Тогда после прибавления восстановителя полу
чают спектр, не совсем сходный с гемохрочргеновым, так как обе полосы поглощения пы-
ражены одинаково резко. Колиско (Koliscko) считает, что этот спектр обусловлен
примесью цианистого соединения к гемохромогену, за что говорит то обстоятельстю,
что при прибавлении к жидкости, дающей спектр гемохромогена, водного раствора хими
чески чистого цианистого калия, обе неодинаковой интенсивности полосы тотчас приобре
тают одинаковую интенсивность, и даже лежащая у линии E полоса кажется более тем
ной в избытке цианистого калия.

ф ³ Об отношении крови к гидроокиси калия см. сообщения союза врачей в Штейер-марке с 1875 по 1876 год. См. также Дворничанко (Vierteljahrss. f. ger. Wei,

1900, 3 F, т. 20, стр. 12) и Г р и г о р ь е в (там же, 1902, 3 F, т. 24, стр. 86); последим , применяет реактивы, состоящие из 12 часгей едкого кали, 40 частей сегнетовой ami¹

100 частей дестиллированной воды.

Г»1

23 Руководство по иудеОнОи медицине, °-"'

ни я производятся по Такому же способу. Маленькие частицы подозрительного пятна наносятся на предметное стекло в 33% едкой щелочи для микро-скоплческого исследования на присутствие кровяных телец; затем препарат слегка подогревается, принимая красную окраску в присутствии крови, и исследуется с помощью микроспектроскопа. Этот способ позволяет доказать присутствие крови даже в мельчайших объектах с наиболее экономным расходованием материала.

•*' Леере рекомендовал гстря'хивать в трубке полученный экстракт гемоглобина с ',цким кали и несколькими каплями пиридина, растворяющим красяшее вещество крови, причем в осадке остаются форменные элементы. Слой пиридина можно непосредственно подвергнуть спектральному анализу или же после высыхания на предметном стекле исследовать с помощью микроспектроскопа. Ипсен предложил извлечение посредством kaluim aceticum purum чистым перегнанным алкоголем, и восстановление полученного щелочного гематина с помощью желтого сернистого аммония.

Если подозрительное на кровь вещество не растворяется ни в едком, ни в цианистом калии, то следует произвести предложенную впервые Струве, затем Краттером на основе исследований Гамерла, гемато-порфириновую пробу с помощью концентрированной уксусной или серной кислоты. По этому способу можно даже из обугленной или измененной под влиянием жара крови получить кислый гематопорфирин в виде красно-ф юлетового раствора, дающего две полосы поглощения, одну узкую ближе к красному полю перед фрауэнгоферовой линией D, и другую, широкую в желто-зеленой части спектра с нерезко ограниченной тенью.

Щелочной гематопорфирин обладает красным цветом; он дает спектр из четырех узких и широких полос поглощения и может быть получен из кислого раствора путем прибавления аммиака, едкого натра или пиридина.

Маленькие частички крови после набухания их в серной кислоте, причем они становятся прозрачными, можно раздавить между двумя предметными стеклами и подвергнуть спектральному анализу. Если дело идет о кровяных следах, пропитывающих материю, то обугливание органических веществ под влиянием .серной кислоты в пробирке может вызвать помутнение раствора, тогда обугленные частицы не оседают. Так же действует и окраска цветной ткани,.на которой имеется кровяное пятно. Подобные краски могут маскировать спектр гемоглобина.

Индиго в щелочном растворе дает спектр, близко напоминающий кислый гематопорфирин. Пурпурная окраска, образуемая пурпурными бактериями, и производные хлО|)Офилла имеют сходство с гемохромогеном, вернее гематопорфирином, однако ошибок в этом отношении нетрудно избежать.

При цветных тканях рекомендуется получить щелочной гематопорфирин. Цимке сливает первую вытяжку, полученную с серной кислотой, извлекает ее вновь, фильтрует через стеклянную ванну, разводит 10—20 кратным количеством дестиллированной воды, причем выпадает осадок гематопорфирина в виде хлопьев. Осадок промывается и растворяется в аммиачном алкоголе.

*~ Сцигети предлагает для растворения даже старых кровяных пятен концентрированную карболовую кислоту с одновременным подогреванием. Красно-бурый раствор дает спектр кислого гематина. Геллер (В. Heller) обращает внимание на сильную красную флуоресценцию кровяного пятна после отщепления гематопорфирина.

Одним из производных гемоглобина, прежде часто применявшимся для судебно-медицинского доказательства происхождения пятна от крови, является г е м и н. При соответствующей обработке пятна гемин получается в виде кристаллов, названных по имени открывшего их (в 1853 г.) кровяными кристаллами Тейхмана. По исследовании Гоппе-Зейлера (Hoppe-Seyler) — это солянокислый гематин, называемый для краткости гемином. Кристаллы гемина получаются следующим образом. Частицы

354

исследуемого вещества обрабатываются ледяной уксусной кислотой с прибавлением следов поваренной соли на часовом или предметном стеклышке; эту счесь прикрывают покровным стеклом и осторожно подогревают до однократного кипения. Полученный бурый раствор выпаривается, в осадке можно доказать микроскопические кристаллы гемина в виде бурых ромбических табличек. Существенное значение имеет воздействие безводной ледяной уксусной кислоты без подогревания вначале, а также медленное выпаривание. Для получения кристаллов гемина предложены различные способы, между прочим замена поваренной соли бромистым или йодистым калием. Ниппе предлагает раствор бромистого, йодистого и хлористого калия 1-аа 0,1 на 100,0 ледяной уксусной кислоты. С этим раствором Малер (Mahler) в институте Цимке получал хорошие результаты. Растворив кровяное пятно в нескольких каплях смеси из ледяной уксусной кислоты и алкоголя в равных частях, после легкого подогревания, он прибавлял несколько капель вышеупомянутого раствора и нагревал до появления пузырьков. Прибавление при этом поваренной соли излишне. Обширные исследования опубликованы Рихтером и Вахгольцем. Бокариус рекомендует концентрированный годный раствор поваренной соли из 0,3 частей на 3 части ледяной уксусной кислоты.

Кристаллы гемина располагаются отдельно (рис. 128) попарно или группами. Если они не вполне сформированы, то имеют форму конопляного семени. Положительный результат геминовой пробы является доказательным на присутствие крови, отрицательный же результат— не доказателен, так как несмотря на несомненное присутствие крови открытие ее удается не всегда, даже при безупречной технике. Примесь жирных веществ, ржавчины, едкого кали, угля и т. д. может служить препятствием.

Другой доказательной для присутствия крови мик
роскопической реакцией является получение кристал- \' / f ч Д _v >
лов гемохромогена. Эта реакция удается даже в n . / ч, .»' >• »
тех случаях, когда геминовая проба дает отрицательный \ ' " "-f '

результат. На предметное стекло наносят одну каплю вод- / ' t** \ " S '^
ной" вытяжки кровяного пятна и по одной капле свежего . \ / / i \ • I »
раствора пиридина и сернистого аммония и накрывают пок- * _ч * ч •*» » V v
ровным стеклышком. ' '' ' Ч \ ,

„ ,- - ' » U'Л. v '

При этом образуются различной величины _v \ , _v ^ _v'v ^

красного цвета ромбические или игольчатые кристаллы, располагающиеся большей частью в виде ^Рис- '-⁸- ^Вполне обра-друз, звезд, пучков. При исследовании их с по- зовавшиеся^ристаллы мощью микроспектроскопа можно обнаружить спектр гемохромогена. В этом преимущество данной кровяной пробы.

Дата добавления: 2019-02-13; просмотров: 200; Мы поможем в написании вашей работы!

Поделиться с друзьями:

⇐ Предыдущая 34 35 36 37 383940 41 42 43 Следующая ⇒

Мы поможем в написании ваших работ!